阿德福韋酯片劑在中國健康志愿者體內(nèi)的藥動學(xué)和安全性.pdf

1、阿德福韋酯(adefovir dipivoxil，ADV)屬于新一代核苷類似物，它與其它核苷類似物不同，含有單磷酸，在轉(zhuǎn)化為活性二磷酸物時不依賴于細胞特異性核苷激酶，故在多種細胞內(nèi)有較強的活性。國外臨床研究資料表明，ADV不僅對野生乙型肝炎病毒(HBV)，而且對拉米夫定耐藥突變株都具有顯著的抑制作用，在72～136 wk的治療期間未發(fā)現(xiàn)與ADV相關(guān)的耐藥性病毒株。因此ADV的出現(xiàn)成為治療拉米夫定耐藥病毒感染的補充、替代辦法，成為聯(lián)合治療

2、慢性乙型肝炎的藥物之一，成為解決核苷類似物耐藥問題的有效辦法，具有廣泛的臨床應(yīng)用前途。但是影響ADV廣泛應(yīng)用的主要是腎毒性，其發(fā)生具有后發(fā)性，與劑量和療程相關(guān)，主要發(fā)生在高劑量(60 mg.d<'-1>或120 mg.d<'-1>)治療HIV感染或30 mg.d<'-1>治療HBV感染的臨床試驗。鑒于此，ADV的劑量、療程和安全性是用于治療慢性乙型肝炎的一個至關(guān)重要的因素。ADV由美國Gilead Sciences Inc研制，2002

3、年9月經(jīng)FDA批準在美國上市，用于慢性乙型肝炎的治療。在我國，ADV尚處于研發(fā)階段，在中國人體內(nèi)藥代動力學(xué)結(jié)果尚未公布。本課題通過中國健康志愿者單次、多次口服阿德福韋酯片劑，測定血漿、尿液中的藥物濃度，計算藥代動力學(xué)參數(shù)，并觀察不良事件，從而研究ADV在中國人體內(nèi)單劑量和穩(wěn)態(tài)下的藥代動力學(xué)特征，評價安全性，探討ADV用于臨床抗HBV的劑量、療程和安全性。本課題選用的藥物為國內(nèi)廠家開發(fā)的一類新藥阿德福韋酯，該藥物創(chuàng)新點在于設(shè)計了新的合成制

4、備路線，同時在制備中采取新的結(jié)晶方法，所得晶形也與Gilead公司的有所不同。研究結(jié)果表明國產(chǎn)阿德福韋酯片劑吸收迅速，分布于全身體液，C<,max>，AUC與劑量呈正相關(guān)，CL/F和V/F不存在劑量相關(guān)性，主要經(jīng)腎臟排泄，連續(xù)給藥未見蓄積，血藥濃度4天達穩(wěn)態(tài)，所得藥代動力學(xué)參數(shù)同Gilead Sciences Inc公布的基本一致。中國健康志愿者單次口服ADV 5～30mg及連續(xù)口服10mg均較安全，研究提示ADV長期用藥需注意肝、腎功

5、能、磷酶肌酸激酶(CK)的變化。本課題在國內(nèi)首次研究國產(chǎn)阿德福韋酯的藥代動力學(xué)和安全性，使用的液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法為國內(nèi)首創(chuàng)，且將首次公布ADV在中國健康人群中的藥代動力學(xué)數(shù)據(jù)，為臨床安全、合理、有效使用ADV提供了科學(xué)依據(jù)，具有重要的理論意義和巨大的應(yīng)用價值。本課題主要由以下方面組成： (1)阿德福韋酯在人體血漿、尿液中藥物濃度測定方法的建立選用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，其中生物樣本預(yù)處理使用固相萃取法，接口采用氣動輔助電噴霧離子

6、源，內(nèi)標(biāo)選用9-(2-膦酰甲氧基丙基)腺嘌呤?？己朔椒ǖ膶傩?、精密度、準確度、靈敏度、線性以及生物樣本的穩(wěn)定性。由于ADV為阿德福韋的前體藥物，進入體內(nèi)很快被完全水解為單酯代謝物和阿德福韋，口服ADV后，血漿中檢測不到ADV原型及單酯，故本方法測定的是阿德福韋藥物濃度。結(jié)果表明阿德福韋和內(nèi)標(biāo)的平均保留時間分別為1.9、2.6min，血漿、尿液中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾阿德福韋和內(nèi)標(biāo)的測定。血漿、尿液樣本最低定量檢測限分別為1ng.mL<'-

7、1>、50ng.mL<'-1>，血漿線性范圍為1～200 ng．mL<'-1>。血液、尿液樣本以及經(jīng)萃取后的樣本室溫(25℃)放置24h穩(wěn)定。該測定方法專屬性強，重現(xiàn)性好，準確度和靈敏度高，前處理過程簡化。 (2)阿德福韋酯藥代動力學(xué)和安全性試驗標(biāo)準操作規(guī)程的建立建立了藥物Ⅰ期臨床試驗的標(biāo)準操作規(guī)程，阿德福韋酯藥代動力學(xué)血、尿樣本收集的標(biāo)準操作規(guī)程，阿德福韋酯生物樣品前處理的標(biāo)準操作規(guī)程等8項，有利于本試驗的質(zhì)量控制。

8、(3)中國健康志愿者單劑量口服阿德福韋酯片劑后的藥代動力學(xué)和安全性試驗采用隨機、開放、三交叉、拉丁方設(shè)計的方法，12名健康中國男性志愿者隨機分為三組(每組4名)，在3個周期里單次空腹口服阿德福韋酯5mg(A)、10mg(B)、30mg(C)，給藥序列分別為ABC、BCA、CAB，給藥間隔7天，最后1個周期結(jié)束后跟蹤隨訪7天。志愿者在服藥前即刻和服藥后0.5，0.75，1，1.5，2，2.5，3，4，6，8，12，24，36和48h靜脈采

9、血約5mL，離心、分離并轉(zhuǎn)移血漿，于-30℃保存待測。用非房室方法(WinNonLin 4.1)計算藥代動力學(xué)參數(shù)，用SPSS(10.0)統(tǒng)計分析單劑量給藥的AUC<,0-t>,C<,max>與劑量的相關(guān)性，對藥代動力學(xué)參數(shù)進行方差分析。志愿者經(jīng)全面體檢合格后入組，每一試驗周期給藥前夜進行評估，內(nèi)容包括病史的更新、體格檢查、生命體征、12導(dǎo)聯(lián)心電圖、不良事件。每次給藥前，采集血、尿樣本進行實驗室檢查。給藥后48h內(nèi)留在研究基地接受不良事

10、件觀察。每次給藥后48h進行體格、生命體征、12導(dǎo)聯(lián)心電圖檢查，并采集血、尿樣本用于實驗室檢查。整個研究過程中觀察不良事件，直至隨訪期結(jié)束。試驗結(jié)果顯示單劑量服用阿德福韋酯5，10，30 mg后，AUC<0-t>分別為(102.7±51.7)，(235.0±82.3)，(715.4±267.6)ng.h.mL<'-1>；C<,max>分別為(11.4±3.7)，(25.4±8.2)，(76.3±23.0)ng.mL<'-1>；t<,ma

11、x>分別為(1.69±1.41)，(0.90±0.56)，(0.94±0.50)h；t<,1/2>分別為(10.50±5.38)，(9.17±2.83)，(8.45±1.38)h；V/F分別為(447.22±197.53)，(518.74±153.87)，(543.22±173.06)L；CL/F分別為(30.45±5.40)，(41.04±12.44)，(45.81±17.00)L.h<'-1>。方差分析表明，取對數(shù)的歸一化的C<,m

12、ax>、AUC<,0-t>。和AUC<,0-∞>不受劑量和給藥周期的影響(P>0.05)，受志愿者個體的影響(P<0.05)。12名健康志愿者單次口服阿德福韋酯片后，3例發(fā)生谷丙轉(zhuǎn)氨酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶，磷酸肌酸激酶升高，未做處理，停藥后均能恢復(fù)正常。結(jié)果表明在5～30mg，ADV對中國健康男性志愿者較安全。(4)中國健康志愿者多次口服阿德福韋酯片劑達穩(wěn)態(tài)后的藥代動力學(xué)和安全性試驗采用隨機、雙盲、安慰劑對照方法，15名健康志愿者按男、女性別分

13、層隨機，分為試驗組和安慰劑組，其中試驗組12人(男、女各6名)，安慰劑組3人(男2名、女1名)。第1天，15名志愿者口服10mg ADV(或安慰劑)1次，收集48h內(nèi)的血、尿樣本。第3天起，每日口服10mg ADV(或安慰劑)1次，連續(xù)服用5天，給藥結(jié)束后跟蹤隨訪7天。志愿者首次服藥(第一天)和末次服藥(第7天)，在服藥前即刻和服藥后0.5，0.75，1，1.5，2，2.5，3，4，6，8，12，24，36和48h靜脈采血，離心分離血漿

14、，分別用于計算單劑量和穩(wěn)態(tài)下ADV的藥代動力學(xué)參數(shù)。在第3天～第6天，分別采集服藥前即刻和服藥后1h血樣本，用于測定血漿藥物谷濃度和峰濃度。首次服藥后，收集服藥后0-4、4-8、8-12、12-24、24-36、36-48小時的尿液，測量每一時間段的排尿總量，并轉(zhuǎn)移每一時間段的5mL混合尿液于-30℃保存待測，估算ADV的腎臟清除率。用非房室方法(winNonLin 4.1)計算藥代動力學(xué)參數(shù)。志愿者經(jīng)全面體檢合格后入組，在首次服藥和末

15、次服藥前夜進行評估，內(nèi)容為病史的更新、體格檢查、生命體征、12導(dǎo)聯(lián)心電圖、不良事件。在首次服藥前(第1天)、首次服藥后48h、第4天服藥前、末次服藥(第7天)后48h采集血、尿標(biāo)本進行實驗室檢查，在第14天進行體格、生命體征、12導(dǎo)聯(lián)心電圖檢查，并采集血、尿樣本用于實驗室檢查。整個研究過程中觀察不良事件，直至隨訪期結(jié)束。試驗結(jié)果顯示單次和多次口服10mg阿德福韋酯達穩(wěn)態(tài)后，AUC<,o-t>分別為(205.8±53.1)，(288.8±

16、90.6)ng.h.mL<'-1>；C<,max>，分別為(21.5±5.1)，(26.7±7.2)ng.mL<'-1>；t<,max>分別為(1.06±0.41)，(0.94±0.44)h；t<,1/2>分別為(8.12±2.02)，(9.68±2.84)h；V/F分別為(545.9±186.5)，(464.2±119.5)L；CL/F分別為(46.2±8.9)，(34.8±9.4)L.h<'-1>。單次口服10mg阿德福韋酯48h內(nèi)

17、，排入尿中的阿德福韋占給藥劑量的(67.8±15.7)％，說明腎臟是阿德福韋的主要排泄途徑。第3天～第6天的谷、峰濃度提示血藥濃度在第4天達穩(wěn)態(tài)。C<,max>和AUC的觀察積累比(第7天的AUC<,0-24>除以第1天的AUC<,0-24>)分別為1.23和1.28，AUC的穩(wěn)態(tài)積累比(第7天的AUC<,0-24>除以第1天的AUC<,0-∞>)為1.13，提示連續(xù)給藥5天，每天10mg，ADV基本沒有蓄積現(xiàn)象。15名志愿者在研究期間