氯乙烯作業(yè)工人接觸評估與遺傳損傷風險.pdf

1、氯乙烯單體(vinyl chloride monomer，VCM)是一種重要的化工原料，主要用于合成聚氯乙烯。隨著石油工業(yè)的迅速發(fā)展，氯乙烯的產(chǎn)量在全球直線上升。我國目前年產(chǎn)量約占全球產(chǎn)量的1/10，已成為世界聚氯乙烯生產(chǎn)大國。因此，龐大的職業(yè)接觸氯乙烯人群的健康問題值得關(guān)注。
　　VCM是確定的人類致癌劑，可導致多系統(tǒng)、多器官腫瘤的發(fā)生。對其致癌機制的研究認為主要是VCM活性代謝產(chǎn)物導致遺傳物質(zhì)損傷而啟動致癌過程。目前，發(fā)達國家

2、VCM職業(yè)接觸限值多為1ppm(2.79mg/m3，PEL)，而我國VCM時間加權(quán)平均容許濃度(PC-TWA)為10mg/m3，短時間接觸容許濃度為(PC-STEL)20mg/m3，高于西方國家衛(wèi)生標準數(shù)倍。在我國現(xiàn)行衛(wèi)生標準接觸濃度情況下，能否對接觸工人的遺傳物質(zhì)產(chǎn)生損害作用需進一步探討。而且在同樣接觸條件下，并不是所有個體都會發(fā)生遺傳損傷乃至腫瘤，提示接觸VCM個體腫瘤的遺傳易感性不同。外來化學物對機體的效應具有個體差異，目前研究較

3、多的是有關(guān)氯乙烯代謝酶類的多態(tài)性。已有部分DNA修復基因多態(tài)性與氯乙烯所致?lián)p傷關(guān)系的報道。有關(guān)研究多是基因單個位點的報道，同一基因多個位點及其單體型以及不同基因之間及環(huán)境交互作用的分析較少。每個人DNA損傷修復能力的差異是決定該個體遺傳損傷易感性的一個因素，通過對氯乙烯作業(yè)工人DNA損傷修復能力的檢測，就能早期發(fā)現(xiàn)易感個體，保護易感工人的健康。
　　本研究通過對接觸VCM工人累積接觸劑量的較準確計算，來評估累積接觸劑量和VCM作業(yè)

4、工人肝損傷及染色體損傷之間的關(guān)系，探討接觸較低濃度VCM時的主要效應標志物；通過人群研究探討DNA損傷修復基因與VCM致遺傳物質(zhì)損傷之間的關(guān)系，為尋找易感性標志物，早期發(fā)現(xiàn)易感人群，提供基礎(chǔ)研究資料。
　　本次研究對象包括山東某化工企業(yè)VCM接觸工人人數(shù)335例(男272例，女63例)，該企業(yè)對照人數(shù)165例(男119例，女46例)以及健康對照人群41例(男20例，女21例)；通過參與健康監(jiān)護體檢對VCM接觸工人的肝功能(血清丙氨

5、酸氨基轉(zhuǎn)移酶，ALT)和肝B超情況進行分析，結(jié)果顯示VCM接觸組和對照組肝功能檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義，肝B超結(jié)果雖然有統(tǒng)計學差異(P<0.05)，但是缺乏特異性，且對化學致癌物引起遺傳損傷的針對性差。在目前職業(yè)性VCM接觸水平較低的情況下，肝功能和肝B超檢測結(jié)果不能作為VCM接觸的特異指標，但這兩項指標在VCM職業(yè)工人健康監(jiān)護中仍有一定意義。
　　本次研究對143例VCM接觸工人(男129例，女14例)血清中氧化損傷標志物8-O

6、HdG進行了檢測，結(jié)果顯示該指標在男女間有統(tǒng)計學差異(P<0.05)，但是不同接觸組間沒有顯著統(tǒng)計學差異，本結(jié)果顯示血清8-OHdG不能作為氯乙烯敏感的損傷指標，須在以后的調(diào)查研究中仔細考慮吸煙，飲酒，性別，年齡等多個影響因素，才可以判斷是否能夠?qū)?-OHdG作為有效的生物標志。
　　利用胞質(zhì)分裂阻滯微核試驗方法(簡稱CB微核試驗)對VCM接觸工人和對照人群染色體損傷進行檢測，共成功獲得494例(接觸組317例，對照組177例)微

7、核結(jié)果，分析顯示VCM接觸組外周血淋巴細胞微核細胞率(簡稱微核率)，顯著高于對照組FR=2.31(95％CI1.81-3.01)，P<0.01，提示外周血淋巴細胞微核率可以作為評價低濃度VCM接觸的效應指標。
　　基準劑量(BMD)分析微核發(fā)生率與氯乙烯累積接觸劑量關(guān)系，分析表明男性氯乙烯接觸總劑量基準劑量95％可信區(qū)間下限(BMDL)為6.37g，女性為5.29g，表明在總接觸劑量達到BMDL值時將引起微核損傷。為制定氯乙烯接觸

8、限值提供了參考。該結(jié)果還顯示出女性相對男性為微核損傷的易感人群。
　　繼而以外周血淋巴細胞微核率作為染色體損傷的效應指標，應用PCR-RFLP和CRS-RFLP法對335名VCM接觸工人的DNA損傷修復基因的多態(tài)位點進行檢測，應用Poisson回歸分析和PHASE2.0.2軟件分析各基因多態(tài)位點及其雙倍型與染色體損傷之間的關(guān)系。選擇參與堿基切除修復(簡稱BER)和核苷切除修復(簡稱NER)過程的8個關(guān)鍵的DNA損傷修復基因：XRC

9、C1、APE1、XPC、XPG、XPA、ERCC1、XPF、XPD，對其15個常見多態(tài)位點(BER途徑：XRCC1-77C/T，XRCC1Arg194Trp，XRCC1Arg280His，XRCC1Arg399Gln，APE1 Asp148Glu。NER途徑：XPA423G，XPC.PAT，XPC Ala499Val，XPC Lys939Gln，XPD Met199Ile，XPD4sp312Asn，XPD Lys751Gln，XPF5’

10、-UTR T2063A，XPGExon15 G-C，ERCC13'-UTR C8092A)講行檢測和分析。
　　結(jié)果發(fā)現(xiàn)XRCC1 T-77C，XRCC1Arg194Trp，XRCC1Arg280His，XRCC1Arg399Gln基因突變位點為VCM致染色體損傷的危險因素。與XRCC1-77TT基因型攜帶者相比，XRCC1-77CT和XRCC-77CC基因型攜帶者的微核率明顯增加，F(xiàn)R=1.29(95％CI1.14-1.47)P

11、<0.01；與XRCC1194 Arg/Arg基因型攜帶者相比，XRCC1194Arg/Trp和XRCC1194 Trp/Trp基因型攜帶者的微核率明顯增加，F(xiàn)R=1.17(95％CI1.04-1.32)P<0.01；與XRCC1280 Arg/Arg基因型攜帶者相比，XRCC1280 Arg/His和XRCC1280 His/His基因型攜帶者的微核率明顯增加，F(xiàn)R=1.28(95％CI1.13-1.44)P<0.01；與XRCC13

12、99Arg/Arg基因型攜帶者相比，XRCC1399Arg/Gln和XRCC1399 Gln/Gln基因型攜帶者的微核率明顯增加，F(xiàn)R=1.23(95％CI1.09-1.38)P<0.01。XRCC1各位點雜合基因型和突變基因型可以顯著增加個體染色體損傷風險，與氯乙烯累積接觸劑量存在交互作用(P<0.01)。個體攜帶的突變位點數(shù)越多，接觸劑量越大，微核發(fā)生率越高。以XRCC1 T-77C為例，與攜帶XRCC1-77TT基因型的低劑量接觸

13、組工人相比，攜帶XRCC1-77TC或CC基因型的低劑量接觸組工人，攜帶XRCC1-77TT基因型的高劑量接觸組工人以及攜帶XRCC1-77TC或CC基因型的高劑量接觸組工人微核率依次增加，F(xiàn)R分別為1.16，95％CI=0.94-1.43；FR=1.31，95％CI=1.13-1.52 P<0.01；FR=1.72，95％CI=1.45-2.02 P<0.01。
　　XRCC1 T-77C，XRCC1Arg194Trp，XRCC

14、1Arg280His，XRCC1Arg399Gln四個多態(tài)位點兩兩之間D’均大于0.7，相互之間緊密連鎖。XRCC1 T-77C，XRCC1Arg194Trp，XRCC1Arg280His，XRCC1Arg399Gln四個等位基因雙倍型分析結(jié)果顯示，調(diào)整吸煙、飲酒、性別因素后，以TGGG/TGGG作為參比，CAAA/CAAA，TAAA/TAAA，CGAA/CAAA的微核率要明顯升高：FR=1.25，95％CI=1.05-1.48 P<0

15、.05；FR=1.31，95％CI=1.04-1.65 P<0.05：FR=1.56，95％CI=1.07-2.19 P<0.05。說明這些雙倍型人群為VCM致染色體損傷的易感人群，應加強監(jiān)護。
　　調(diào)整混雜因素如年齡、性別、累計接觸劑量以及吸煙、飲酒等因素后，而XPCPAT，XPF5’-UTR T2063A兩個基因的突變位點是遺傳損傷的保護因素，與野生純合型比較，F(xiàn)R=0.82，95％CI=0.69-0.98和FR=0.80，9

16、5％CI-0.67-0.95(P<0.05)，而XPA A23G和XPC Lys939Gln兩個基因的突變位點為VCM致染色體損傷的危險因素，與野生純合型比較FR=1.20，95％CI=1.03-1.40和FR=1.30，95％CI=1.05-1.62(P<0.05)。
　　各位點基因型與累積接觸量對微核率聯(lián)合效應分析表明，與攜帶各多態(tài)位點野生基因型的低接觸組工人相比，攜帶XPA A23G，XPC Ala499Val，XPCLys

17、939Gln，XPD Met199Ile，XPD Lys751Gln，XPGExon15G-C，ERCC13-UTRC8092A雜合基因型或突變基因型的低接觸組工人，以及攜帶雜合基因型或突變基因型的高接觸組工人微核率增加顯著。接觸劑量越高，攜帶的突變位點數(shù)越多，遺傳損傷發(fā)生的風險越大(P<0.05)，與BER途徑XRCC1各位點情況類似；而攜帶XPF5'-UTRT2063A雜合基因型或突變基因型的低接觸組工人微核發(fā)生率，與攜帶野生基因型

18、的低接觸組工人相比顯著降低FR=0.71，95％CI=0.55-0.91P<0.01；攜帶XPCPAT，XPF5'-UTRT2063A雜合基因型或突變基因型的高劑量接觸組工人微核發(fā)生率，與攜帶野生基因型的高劑量接觸組工人相比顯著降低(P<0.05)。
　　XPCPAT、XPC499和XPC939三個多態(tài)位點兩兩之間D’均大于0.7，相互之間緊密連鎖。XPCPAT，XPC499和XPC939三個等位基因雙倍型分析結(jié)果顯示，以PAT-

19、CA/PAT-CA作為參比，結(jié)果顯示稀有類型，PAT+CA/PAT-CA，PAT-AC/PAT-TC，PAT+TC/PAT+TA微核率顯著高于PAT-CA/PAT-CA，F(xiàn)R=1.47，95％CI=1.20-1.79 P<0.01；FR=2.73，95％CI=1.95-3.72 P<0.01；FR=1.20，95％CI=1.03-1.40 P<0.05；FR=1.48，95％CI=1.19-1.82 P<0.01，PAT-TC/PAT+

20、TC的微核率顯著低于PAT-CA/PAT-CA，F(xiàn)R=0.33，95％CI=0.15-0.62 P<0.01。XPD199、XPD312和XPD751三個等位基因雙倍型分析結(jié)果顯示平衡可能的混雜因素如年齡、性別、累計接觸劑量以及吸煙飲酒等因素后，以CCA/CCA作為參比，結(jié)果顯示CCC/CCC，ATA/CTA微核率顯著高于CCA/CCA，F(xiàn)R=1.34，95％CI=1.10-1.63 P<0.01：FR=1.55，95％CI=1.06-