烏司他丁對(duì)人絨毛膜癌uPA表達(dá)及侵襲的影響.pdf

1、目的：檢測(cè)尿激酶型纖溶酶原激活物(urokinase-typeplasminogen activator,uPA)在不同侵襲力人絨毛膜癌細(xì)胞株JEG-3和JAR中的表達(dá)差異及尿胰蛋白酶抑制劑(urinary trypsin inhibitor,UTI)烏司他丁(Ulinastatin)對(duì)高侵襲力人絨毛膜癌JEG-3細(xì)胞中uPAmRNA的表達(dá)及細(xì)胞體外侵襲能力的影響,探討uPA表達(dá)與絨毛膜癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系及烏司他丁在絨毛膜癌中抗侵襲轉(zhuǎn)移作

2、用及機(jī)制。
　　 方法：(1)體外培養(yǎng)不同侵襲力人絨毛膜癌細(xì)胞株JEG-3和JAR；(2)Matrigel體外侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人絨毛膜癌細(xì)胞JEG-3和JAR細(xì)胞侵襲能力,運(yùn)用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)兩種細(xì)胞中uPAmRNA的表達(dá)情況,并比較其差異；(3)將高侵襲力人絨毛膜癌JEG-3細(xì)胞分別在含0U/ml、50U/M

3、、100U/ml、200U/ml、400U/ml、800U/ml烏司他丁的培基中培養(yǎng)24小時(shí),提取細(xì)胞總RNA,運(yùn)用RT-PCR方法檢測(cè)不同藥物濃度組JEG-3細(xì)胞中uPA mRNA的表達(dá)情況；Matrigel體外侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞的侵襲能力變化,并比較各組之間的差異,分析細(xì)胞侵襲能力、uPAmRNA表達(dá)水平、藥物濃度之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：(1)在兩種細(xì)胞中均檢測(cè)到uPA mRNA的表達(dá),在高侵襲力JEG-3細(xì)胞中uPA

4、mRNA表達(dá)明顯強(qiáng)于低侵襲力JAR細(xì)胞,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；(2)不同濃度烏司他丁作用后的JEG-3細(xì)胞中均檢測(cè)到uPA mRNA的表達(dá),當(dāng)藥物濃度組在50U/ml時(shí),與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；當(dāng)藥物濃度100U/ml及以上時(shí),與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),且各組間uPA mRNA表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；隨著藥物濃度的增加uPA mRNA表達(dá)減弱,相關(guān)性分析顯示uPA

5、mRNA水平與藥物濃度之間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.862,P＜0.05)；(3)不同濃度的烏司他丁作用后的JEG-3細(xì)胞穿膜數(shù)均減少,當(dāng)藥物濃度為50U/ml時(shí),與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；當(dāng)藥物濃度在100U/ml及以上濃度時(shí),與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),各組間侵襲力差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；細(xì)胞穿膜數(shù)隨著藥物濃度的增加而減少,隨著uPAmRNA表達(dá)水平降低而減少,相關(guān)性分析顯示侵襲水平與藥