CTGF、HGF及Cx43在PCOS大鼠卵巢中的表達及二甲雙胍的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　以來曲唑誘導的多囊卵巢綜合征[1]（Polycysticovarysyndrome,PCOS）大鼠模型為研究對象，探討結(jié)締組織生長因子(CTGF)、肝細胞生長因子（HGF）、間隙連接蛋白43（Cx43）在多囊卵巢綜合癥（PCOS）大鼠卵巢中的表達，并探討應(yīng)用胰島素增敏劑-二甲雙胍后，PCOS大鼠卵巢這三種因子的變化，探討其用于干預(yù)PCOS的作用機理。
　　方法：
　　選取大鼠55只（6周齡清潔級雌性Wist

2、ar），依據(jù)體重及窩別隨機分為對照組15只、模型組40只。應(yīng)用來曲唑造模，大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，每日行陰道涂片(巴氏染色)監(jiān)測大鼠的動情周期的變化。喂養(yǎng)21天后，從模型組40只中隨機選取10只用于造模效果評價，當成功率大于80％時，將模型組剩余的30只大鼠，隨機分為二甲雙胍干預(yù)組15只和PCOS組15只，分別喂服二甲雙胍300mg/(kg·d)和等量生理鹽水。14天后各組大鼠進行口服葡萄糖耐量實驗（OGTT），血糖儀測定空腹血糖（FPG

3、）、服糖后1h血糖（1hPG）、服糖后2h血糖（2hPG），采用放射免疫法測定各組大鼠血清黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睪酮(T)、雌二醇(E2)值及空腹胰島素（FIN）值。然后將大鼠稱重并解剖，打開腹腔摘取卵巢，進行固定、包埋，并組織切片后將標本HE染色光鏡下觀察卵巢組織的病理結(jié)構(gòu)變化，最后采用免疫組化法測定卵巢組織中CTGF、HGF、CX43的表達水平，并采用圖像分析儀獲取三種因子表達的灰度值進行統(tǒng)計學分析。
　　

4、結(jié)果：
　　1．動情周期的變化：應(yīng)用來曲唑12天后大鼠動情周期發(fā)生變化，表明無排卵[2]；而對照組動情周期依然存在規(guī)律性。
　　2．卵巢解剖學變化：與對照組相比，PCOS組大鼠卵巢重量升高(P<0.05)。對照組卵巢顏色較紅，體積較??；模型組大鼠卵巢顏色蒼白，體積較大，包膜下隱約可見擴張的卵泡。與PCOS組相比，干預(yù)組卵巢重量顯著降低(P<0.05)，卵巢體積較PCOS組明顯縮小。
　　3．卵巢組織學變化：對照組鏡下可

5、見多個不同發(fā)育程度的卵泡，顆粒細胞呈6-8層，形態(tài)完整，卵泡膜細胞排列整齊。PCOS組鏡下可見卵泡呈擴張狀態(tài)，卵泡內(nèi)卵母細胞或放射冠消失，顆粒細胞層數(shù)減少，且排列松散，卵泡膜細胞層相對明顯增厚，干預(yù)組鏡下見顆粒細胞層數(shù)有所增加，卵泡膜細胞層明顯變薄。
　　4．OGTT及FIN水平：PCOS組血清FIN水平、FPG、1hPG、2hPG顯著高于對照組(P<0.05)；干預(yù)組血清FIN水平、FPG、2hPG顯著低于PCOS組(P<0.0

6、5).
　　5．血清性激素水平：PCOS組血清LH、T濃度顯著高于對照組(P<0.05)，血清FSH、E2濃度顯著低于對照組(P<0.05)；干預(yù)組血清LH、T濃度顯著低于PCOS組(P<0.05)，血清FSH、E2濃度顯著高于PCOS組(P<0.05)。
　　6.卵巢局部調(diào)節(jié)因子的表達：PCOS組卵巢顆粒細胞及卵泡膜細胞CTGF、HGF表達較對照組升高，Cx43的表達降低(P<0.05)，而在干預(yù)組CTGF、HGF的表達比