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1、目的:研究已證實(shí),腦出血(ICH,intercerebral hemorrhage)后血腫中紅細(xì)胞溶解釋放的血紅蛋白Hb(hemoglobin)及Hb降解產(chǎn)物在腦出血后腦水腫形成中起著重要作用。結(jié)合珠蛋白Hp( haptoglobin)是血液中重要成分,可與Hb結(jié)合形成緊密的非共價(jià)復(fù)合物Hb-Hp,使Hb降解受抑制,據(jù)此推測(cè)Hp在腦出血后腦水腫形成中具有抑制作用。本課題擬通過在SD大鼠腦內(nèi)研究自體全血中去除或外加Hp后對(duì)實(shí)驗(yàn)性ICH模型
2、血腫中Hb及其代謝產(chǎn)物含量變化及其與血腫周圍腦組織含水量、血腦屏障變化、炎性細(xì)胞因子含量、自由基形成的關(guān)系。方法:將100只200-250g成年健康雄性SD大鼠隨機(jī)分成四組:假手術(shù)組(25只)、ICH組(25只)、Hp去除組(25只)、Hp干預(yù)組(25只)。①假手術(shù)組②ICH對(duì)照組③Hp去除組:斷尾取血100ul,采用親和層析法去除Hp。采用立體定向大鼠尾狀核注入去除Hp后的自體全血50ul制作。④Hp干預(yù)組:斷尾取血100ul,加入1
3、00ul所需Hp凍干粉相應(yīng)量,采用立體定向大鼠尾狀核注入外加Hp后的自體全血50ul制作。按上述不同術(shù)后時(shí)間斷頸處死大鼠,仔細(xì)分離大腦及血腫標(biāo)本進(jìn)行相應(yīng)處理.①觀察上述四組不同時(shí)間血腫中Hb及Hb降解產(chǎn)物(血紅素、CO、鐵離子、膽紅素)含量變化。采用免疫組化分析及分光光度法。②觀察腦組織含水量的變化③觀察腦組織自由基SOD、MDA含量變化④觀察上述四組不同時(shí)間血腫周圍腦組織炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-a含量變化⑤觀察上述四
4、組不同時(shí)間血腫周圍腦組織血腦屏障病理變化:采作光鏡和電鏡觀察。結(jié)果:1.假手術(shù)組在術(shù)后各時(shí)點(diǎn)神經(jīng)功能障礙評(píng)分、腦組織含水量、Hb及其降解產(chǎn)物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、SOD、MDA含量均未見明顯異常。2.ICH對(duì)照組、Hp去除組神經(jīng)功能障礙評(píng)分和SOD活力顯著高于假手術(shù)組;腦組織含水量、Hb及其降解產(chǎn)物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、MDA含量顯著低于假手術(shù)組。3.Hp干預(yù)組神經(jīng)功能障礙評(píng)分和SOD活力顯著高于IC
5、H對(duì)照組、Hp去除組;而腦組織含水量、Hb及其降解產(chǎn)物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、MDA含量顯著高于假手術(shù)組。結(jié)論:1.ICH后,大鼠出現(xiàn)明顯神經(jīng)功能損害,腦組織含水量增加,出現(xiàn)血腫周圍腦組織水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生、自由基大量生成、MDA含量明顯升高,SOD活力明顯下降。2.ICH后3天紅細(xì)胞大量溶解,腦水腫達(dá)高峰,血腫周圍腦組織Fe含量、血紅素含量、UCB含量和CO含量顯著并且持續(xù)升高,腦水腫消退后血腫周圍腦
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