羥苯磺酸鈣對大鼠半乳糖性白內(nèi)障抑制作用的實驗研究.pdf

1、研究目的：觀察不同劑量羥苯磺酸鈣對大鼠半乳糖性白內(nèi)障的抑制和防治作用,初步探討其作用機(jī)理。
　　 對象與方法：選取20天齡的兩性Wistar大鼠,體重約50～60g,共50只,復(fù)方托吡卡胺滴眼液充分散瞳后,裂隙燈顯微鏡觀察晶狀體均透明,將大鼠隨機(jī)分為3組,空白對照組(10只),模型對照組(10只)和模型給藥組(30只)?？瞻讓φ战M給予正常飲食；模型對照組于第21天起給予12.5％D-半乳糖7天,后給予10％半乳糖喂養(yǎng)至21天,每

2、天給予生理鹽水灌胃,正常飲食及飼料；模型給藥組分為高、中、低劑量組,半乳糖溶液喂養(yǎng)方法同上,于第20天即分別采用灌胃針給以羥苯磺酸鈣高劑量組(300mg／kg／d)、中劑量組(150mg／kg／d)及低劑量組(75mg／kg／d)灌胃至實驗結(jié)束,正常飼養(yǎng)。定期給各組大鼠散瞳,觀察并記錄大鼠晶狀體混濁情況。實驗第8天和最后一次給藥后分批處死大鼠,取出眼球,采用眼球后路法分離晶狀體。掃描電鏡下觀察晶狀體纖維結(jié)構(gòu)變化；生化方法測定各組大鼠晶狀

3、體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-px)活性及丙二醛(MDA)含量的變化。免疫組化觀察羥苯磺酸鈣對晶狀體上皮細(xì)胞的影響。
　　 結(jié)果：D-半乳糖梯度喂養(yǎng)幼年大鼠可成功誘導(dǎo)半乳糖性白內(nèi)障動物模型,穩(wěn)定性及安全性增加。
　　 1.裂隙燈觀察:空白對照組大鼠晶狀體持續(xù)保持透明。模型組對照組第8天晶狀體周邊出現(xiàn)大量囊泡,第12天可見典型皮質(zhì)絮狀混濁,第21天均形成成熟期半乳糖性白內(nèi)障。模型給藥組囊泡、皮質(zhì)

4、混濁及核性混濁稍延遲,且晶狀體混濁程度低于模型對照組,而高于空白對照組；模型給藥組內(nèi)高、中、低劑量羥苯磺酸鈣組晶狀體混濁程度未見明顯變化。
　　 2.生化指標(biāo)分析:第8天生化測定顯示:模型給藥組中的SOD及GSH-px活性高于模型對照組(P<0.05),但低于空白對照組(P<0.05)；模型給藥組晶狀體內(nèi)MDA含量低于模型對照組,但高于空白對照組；模型給藥組內(nèi)高、中、低劑量組晶狀體內(nèi)的SOD、GSH-px活性及MDA含量差異均無

5、統(tǒng)計學(xué)意義。第21天生化測定顯示:空白對照組與模型對照組及模型給藥組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),模型給藥組與模型對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),模型給藥組內(nèi)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 3.光鏡和掃描電鏡觀察:空白對照組晶狀體顯示正常顯微組織結(jié)構(gòu),其他各組晶狀體超微組織結(jié)構(gòu)均有不同程度改變。實驗第8天模型給藥組晶狀體纖維較模型對照組晶狀體纖維紋理清楚,較空白對照組紋理模糊；模型給藥組內(nèi)高、

6、中、低劑量組間無明顯差異。實驗結(jié)束后模型給藥組與模型對照組均可見纖維間連接減少或消失,層次間排列紊亂。
　　 4.Tunel標(biāo)記:給藥組內(nèi)細(xì)胞凋亡率明顯高于空白對照組(P<0.05),但卻低于模型對照組(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.單純給予不同濃度的D-半乳糖溶液梯度喂養(yǎng)可以成功誘導(dǎo)幼年大鼠半乳糖性白內(nèi)障模型。
　　 2.體外給予羥苯磺酸鈣,可通過提高晶狀體組織內(nèi)SOD及GSH-px活性,減