CLC-3和AQP-1在大鼠半乳糖性白內(nèi)障晶狀體中表達(dá)的變化.pdf

1、目的：建立D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠模型，利用實(shí)時熒光定量PCR方法檢測氯通道蛋白-3(chloride channel protein-3，CLC-3)和水通道蛋白-1(aquaporin-1，AQP-1)在D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體和正常大鼠晶狀體中含量的變化，探討CLC-3和AQP-1與白內(nèi)障發(fā)病的關(guān)系，為白內(nèi)障病因?qū)W研究提供新的理論基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)方法：（1）建立 D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠動物模型。(2）采用實(shí)時熒光定量PCR方

2、法檢測CLC-3mRNA和AQP-1mRNA在D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體中含量的變化。 結(jié)果：（1）成功建立 D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠動物模型，并進(jìn)行相應(yīng)分期分組。(2）實(shí)時熒光定量PCR方法檢測CLC-3mRNA結(jié)果：1）空白組、生理鹽水對照組和半乳糖組晶狀體中都有CLC-3mRNA的表達(dá)，生理鹽水對照組大鼠在球后注射期間晶狀體內(nèi)CLC-3mRNA的表達(dá)含量無明顯變化。2）第一次給藥后的第3、7和14天時，實(shí)驗(yàn)組晶狀體中CLC

3、-3mRNA的表達(dá)含量逐漸增高，且均高于同期的對照組，第14天時達(dá)最高峰，14天后又開始下降，至21天時實(shí)驗(yàn)組CLC-3mRNA已低于同期對照組晶狀體中CLC-3mRNA表達(dá)的含量。3）Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期晶狀體中CLC-3mRNA的表達(dá)均高于透明晶狀體，且三期晶狀體中CLC-3mRNA的含量呈逐漸增多趨勢，Ⅲ期晶狀體中CLC-3mRNA的含量最高，Ⅳ期和Ⅴ期時其含量又低于正常晶狀體水平。(3）實(shí)時熒光定量PCR方法檢測AQP-1mRNA結(jié)果：

4、1）空白組、生理鹽水對照組和半乳糖組晶狀體中都有AQP-1mRNA的表達(dá)，生理鹽水對照組大鼠在球后注射期間晶狀體內(nèi)AQP-1mRNA的表達(dá)含量有下降趨勢，但差異無顯著性。2)第一次給藥后的第3天開始，半乳糖組晶狀體中AQP-1mRNA的表達(dá)含量即開始下降，到30天時已降至極低水平。且均低于同期的對照組晶狀體中AQP-1mRNA表達(dá)的含量。3)Ⅰ期晶狀體AQP-1mRNA的含量已開始下降，隨著白內(nèi)障的發(fā)展，進(jìn)一步呈下降趨勢，到Ⅴ期時降至極

5、低水平。 結(jié)論：1）CLC-3mRNA在早期D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體中表達(dá)增加，提示CLC-3可能在白內(nèi)障的早期形成過程中發(fā)揮作用。2）CLC-3mRNA 在晶狀體囊泡初期時表達(dá)已開始增加，皮質(zhì)性白內(nèi)障時期時表達(dá)最多，而隨著白內(nèi)障的進(jìn)一步發(fā)展，含量又開始下降。提示CLC-3可能參與了白內(nèi)障的發(fā)生發(fā)展，尤其是皮質(zhì)性白內(nèi)障，為白內(nèi)障的形成機(jī)制提供一個新的理論基礎(chǔ)。3）AQP-1mRNA在早期D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體中表達(dá)即降