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文檔簡介
1、目的:觀察姜黃素(curcumin,CUR)對大鼠外傷性白內(nèi)障(traumatic cataract,TA)晶狀體上皮細胞(lens epithelial cells,LECs)核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)和環(huán)氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表達以及對晶狀體上皮細胞凋亡的實驗研究。
方法:將100只雄性SD大鼠,按隨機分配原則分為5組,每組20只,即空白對照
2、組、陰性對照組、陽性對照組、低濃度CUR組、高濃度CUR組。建立大鼠外傷性白內(nèi)障模型,觀察不同濃度姜黃素對不同時相(12h,24h,72h,168h)大鼠晶狀體混濁形成的影響,在顯微鏡下觀察晶狀體上皮細胞與晶狀體纖維結(jié)構(gòu)的改變。通過免疫組織化學(xué)SABC染色檢測不同時間(12h,24h,72h,168h)晶狀體上皮細胞NF-κB和COX-2表達的情況,通過使用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal deoxynuc
3、leotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)檢測晶狀體上皮細胞凋亡細胞的影響,并進行相關(guān)比較性統(tǒng)計學(xué)分析。
結(jié)果:
1.使用前囊膜劃開法可成功建立外傷性白內(nèi)障大鼠模型。
2.在空白對照組中,大鼠晶狀體始終保持透明狀態(tài);而在外傷性白內(nèi)障模型組中,12h后晶狀體出現(xiàn)混濁,24h晶狀體混濁緩慢加重,72h晶狀體混濁進展加速,1
4、68h時出現(xiàn)全晶狀體混濁。晶狀體混濁情況顯示,隨造模時間延長 CUR組晶狀體混濁度明顯輕于對照組(P<0.01)。
3.在光鏡下,通過HE染色發(fā)現(xiàn)實驗眼晶狀體囊膜創(chuàng)口不見正常立方上皮,上皮細胞不規(guī)則增生,形成新的晶狀體囊使創(chuàng)口愈合,晶狀體外傷通道纖維排列紊亂。
4.免疫組織化學(xué)發(fā)現(xiàn),陰性對照組晶狀體上皮細胞NF-κB與COX-2活化表達明顯增高,與各對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。且隨造模時間的延長,陰
5、性對照組LECs中NF-κB和COX-2活化表達逐漸增強,各時間段之間陽性表達率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
5.CUR可以明顯抑制NF-κB和COX-2活化表達和減輕晶狀體混濁程度,且存在一定程度的劑量依賴性。
6.TUNEL檢測發(fā)現(xiàn),CUR組各時限凋亡率均明顯低于對照組(P<0.01)。
結(jié)論:
1.外傷性白內(nèi)障中NF-κB和COX-2的表達,對白內(nèi)障的發(fā)生發(fā)展起重要作用。
2
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