沙利度胺抑制卵巢癌細胞增殖及血管生成實驗研究.pdf

1、缺氧是實體腫瘤常見現象，腫瘤在缺氧狀態(tài)下，一方面通過擴張血管、增加血流量來改善氧供，一方面則促進新生血管的生成來獲得更多的氧氣。缺氧是介導血管生成，進一步促使腫瘤生長、轉移的一個關鍵信號。目前已知沙利度胺通過抑制腫瘤細胞生長及血管生成作用達到抗腫瘤生長和轉移治療效果。但沙利度胺對卵巢癌抑制作用研究較少，本實驗目的是研究沙利度胺對卵巢癌細胞生長及血管生成的抑制作用，探討其對卵巢癌的治療效果及其對腫瘤缺氧下VEGF的上游調控因子的作用。

2、 一、沙利度胺對缺氧下人卵巢癌SKOV3細胞增殖情況影響。 目的：模擬體內腫瘤生長缺氧環(huán)境，觀察沙利度胺對不同缺氧時間下人卵巢癌SKOV3細胞的增殖情況影響，探討沙利度胺對人卵巢癌細胞SKOV3生長抑制作用。 方法：將處于對數生長期的SKOV3細胞分別給予不同濃度沙利度胺處理12小時后，再各自缺氧0小時、8小時、16小時、24小時，用MTT法檢測缺氧對細胞增殖的影響。 結果：24小時內的缺氧，卵巢癌細胞增殖基

3、本不受影響(P<0.05)；各缺氧組中不同濃度沙利度胺可以顯著抑制卵巢癌細胞增殖(P<0.05)，這種抑制作用隨缺氧時間的延長、給藥濃度的增加而增強(P<0.05)。 結論：沙利度胺可以顯著抑制卵巢癌細胞的增殖，且呈時間、濃度效應關系。 二、沙利度胺抑制人卵巢癌SKOV3細胞血管生成表達作用及機制。 1.缺氧誘導下人卵巢癌SKOV3細胞血管內皮生長因子的表達及機制。 目的：研究缺氧對體外培養(yǎng)人卵巢癌SKO

4、V3細胞血管內皮生長因子表達的影響及機制。 方法：建立SKOV3細胞體外缺氧培養(yǎng)模型，經不同時間缺氧處理后(8h、16h、24h)，使用免疫熒光染色半定量分析缺氧下SKOV3細胞HIF-1α及VEGF蛋白表達情況。 結果：免疫熒光半定量證實缺氧后HIF-1α蛋白與VEGF蛋白表達相對常氧條件下差異有顯著性(P<0.05)，HIF-1α蛋白常氧下表達少，缺氧8小時即顯著增加，且隨缺氧時間的增加呈時間效應關系(P<0.05)

5、，VEGF 蛋白常氧下即有表達，缺氧后表達增加，并隨缺氧時間增加呈時間效應關系(P<0.05)，相關分析證實VEGF蛋白表達與HIF-1α蛋白表達呈正相關關系。 結論：缺氧可以顯著增加卵巢癌細胞VEGF蛋白的表達，而HIF-1α是缺氧條件下介導VEGF蛋白表達的重要轉錄因子。 2.沙利度胺對缺氧下人卵巢癌SKOV3細胞血管內皮生長因子的表達影響及機制。 目的：根據第一節(jié)實驗結果選擇合適的缺氧模型條件，進一步研究沙

6、利度胺對缺氧下體外培養(yǎng)人卵巢癌SKOV3細胞血管內皮生長因子表達的影響及機制。 方法：建立SKOV3細胞體外缺氧培養(yǎng)模型，給予不同濃度沙利度胺處理12小時，再進行缺氧處理16小時后，使用免疫熒光染色半定量分析SKOV3細胞HIF-1α及VEGF蛋白表達變化，使用RT-PCR 測定VEGF mRNA表達情況。 結果：免疫熒光半定量結果顯示常氧及缺氧情況下不同濃度沙利度胺均可明顯抑制HIF-1α、VEGF蛋白表達(P<0.0