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文檔簡介
1、目的:探索TXR1基因在鼻咽癌紫杉醇耐藥中的作用,利用RNA干擾技術抑制鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞CNE-1/Taxol的TXR1基因表達,同時研究TXR1基因的表達與鼻咽癌紫杉醇耐藥的相關性。
方法:
1.通過脂質體介導轉染siRNA至鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞株CNE-1/Taxol。
2.利用實時熒光定量RT-PCR、Western-blot方法分別檢測RNA干擾前、后的鼻咽癌紫杉醇耐藥CNE-1/Taxol細胞
2、株的TXR1基因表達差異。
3.利用MTT實驗檢測TXR1基因表達抑制后的鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞CNE-1/Taxol的耐藥性變化,觀察TXR1基因在紫杉醇耐藥過程中的作用。
結果:
1.針對TXR1基因的siRNA轉染耐藥細胞CNE-1/Taxol后,耐藥細胞TXR1的mRNA及蛋白表達均明顯下調。干擾組和陰性對照組的mRNA表達分別是脂質體組mRNA表達量的0.12±0.02倍、0.97±0.07倍,干擾
3、組分別和陰性對照組、脂質體組比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。干擾組、陰性對照組的蛋白表達量分別是脂質體組的0.36±0.07、1.02±0.03倍,干擾組與脂質體組、陰性對照組的蛋白表達相比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
2.TXR1基因表達抑制后,CNE-1/Taxol對紫杉醇的敏感性顯著增高,其IC50值降低了2.12倍,從而部分逆轉CNE-1/Taxol耐藥。
結論:
1.特異性si
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