雌激素對缺血性腦損傷的神經保護和認知修復作用的性別差異性研究.pdf

1、研究背景：
　　腦血管疾病(CVD)是神經系統(tǒng)的常見病和多發(fā)病,嚴重威脅著人類的生命健康。缺血性腦損傷可致選擇性和遲發(fā)性的CA1區(qū)錐體神經元凋亡,導致動物和人類的認知缺失。大部分CVD存活者遺留不同程度的認知障礙,給社會和家庭帶來沉重負擔。女性在絕經期前發(fā)生腦卒中的風險較同齡男性低,但絕經后其腦卒中的發(fā)病率與同齡男性相仿,雌激素替代療法可降低絕經期婦女腦卒中發(fā)生的風險,大量基礎及臨床實驗證實,雌激素(E2)具有神經保護作用。

2、>　　雌激素是一種甾體類固醇激素,由卵巢和腎上腺分泌,其神經保護作用機制包括經典的受體依賴機制和受體非依賴機制。其中,與靶器官中的雌激素受體結合是其在腦內最主要的作用途徑,通常認為雌激素進入細胞后與其受體結合,受體蛋白發(fā)生構型變化后,與DNA的性激素作用元件結合,調節(jié)相關基因表達,產生不同效應。在腦內,雌激素主要通過其兩種受體ERα和ERβ來發(fā)揮作用。目前認為在雌性動物中,雌激素主要通過腦內的ERα受體發(fā)揮作用;而有關雌激素對雄性動物的

3、受體作用機制目前學術界存在爭論。一部分學者認為在雄性小鼠的全腦缺血模型中,ERβ受體介導了雌激素的神經作用,而另一部分學者則持不同觀點。因此,性別因素對雌激素神經保護作用的影響是一個值得研究的問題。
　　有實驗表明,在全腦缺血模型中,雌激素可改善雌性大鼠的認知功能障礙。然而,在臨床上,局灶性腦缺血的發(fā)病率要遠遠大于全腦缺血,而且因缺血方式的差異,神經元的凋亡路徑不同,其認知功能結局也相差甚遠;再者,中風疾病的發(fā)展預后具有性別差異性

4、,對雌性動物有效的藥物未必能夠應用于雄性動物。因此,研究雌激素在局灶性腦缺血模型中的認知保護作用及其性別差異,具有重要的理論意義和臨床應用價值。
　　研究目的；
　　本實驗將健康成年SD大鼠按性別配對分組,阻斷其單側大腦中動脈后給予雌激素治療,觀察大鼠缺血后的神經功能評分、腦梗死體積比、雌激素受體 ERα和ERβ的表達情況及行為學變化,探討雌激素的神經保護和認知保護作用的性別差異,并分析其可能機制。
　　研究方法：

5、r>　　1、動物模型制備采用改良Longa法制作大腦中動脈閉塞模型,根據實驗需要在一定的缺血時間(1.5h)后行拔線再灌注,以獲得實驗所需的MCAO模型。
　　2、TTC染色使用TTC染色的方面結合計算機圖像分析軟件計算梗死區(qū)腦組織的面積。
　　3、免疫組織化學在形態(tài)學上觀察雌激素受體ERα和ERβ表達的部位,對蛋白表達情況進行定性分析。
　　4、RT-PCR結合內參相對定量分析缺血后大鼠腦內ERα和ERβ蛋白mRNA

6、的表達。
　　5、Morris水迷宮實驗用于檢測大鼠在局灶性腦缺血后的認知恢復狀況,評價其空間學習和空間記憶能力。
　　6、統(tǒng)計學處理數據以均數±標準差(x±s)表示,多組樣本均數的比較采用方差分析,兩樣本均數比較采用t檢驗。采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析,以P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　實驗結果顯示,雌激素對成年SD大鼠的局灶性腦缺血損傷具有神經保護和認知修復作用;成年雌性去卵巢大鼠腦缺血