侵襲性垂體腺瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)及標(biāo)志性分子的初步探討.pdf

1、本文分兩部分論述了侵襲性垂體腺瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)及標(biāo)志性分子。 第一部分侵襲性垂體腺瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)。 目的：利用蛋白指紋圖譜技術(shù)分離和識(shí)別侵襲性垂體腺瘤組織差異蛋白的表達(dá)，以其找到有利于侵襲性垂體腺瘤早期診斷、預(yù)后監(jiān)測的標(biāo)志物或標(biāo)志物群。 方法：25例垂體腺瘤組織標(biāo)本取自經(jīng)蝶或開顱手術(shù)，利用蛋白指紋圖譜技術(shù)與激光解析離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)在腫瘤組織原位上分離識(shí)別侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤細(xì)胞的胞膜、胞漿和胞核的

2、差異蛋白，分析其在原位組織中的表達(dá)水平，探討其與垂體腺瘤侵襲性相關(guān)的程度，為更好地研究垂體腺瘤侵襲生物行為提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 結(jié)果：通過蛋白指紋圖譜技術(shù)研究在侵襲性與非侵襲性垂體腺瘤組織中表達(dá)分子量在25,000以下的差異蛋白水平可以看出：差異蛋白質(zhì)峰共有75個(gè)，蛋白質(zhì)表達(dá)含量與侵襲性呈正相關(guān)的峰值有42個(gè)，呈負(fù)相關(guān)的峰值有33個(gè)。其中目前已查到的分子有13個(gè)，而尚未明確的差異蛋白仍有62個(gè)。在對(duì)垂體瘤及瘤周組織的分析中，我們發(fā)現(xiàn)1

3、6個(gè)差異蛋白的峰值，其中3個(gè)蛋白為我們所了解，仍有13個(gè)蛋白為我們所不知。 結(jié)論：垂體腺瘤的侵襲既有內(nèi)在微環(huán)境的作用，也有外在環(huán)境的作用。其過程是源于腫瘤細(xì)胞及周圍組織表達(dá)蛋白質(zhì)的程度不同。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)論中可以看出侵襲性垂體腺瘤比非侵襲性垂體腺瘤表達(dá)含量有差異的蛋白峰值有75個(gè)。如癌基因產(chǎn)生的蛋白質(zhì)Ras、nm23，凋亡因子Bcl2 β，趨化因子IL-8、CXCL12，生長因子TGF β及其受體等。此外，也觀察到來自下丘腦釋放的G

4、RF、GnRH和Ghrelin，也有垂體本身產(chǎn)生的S-100、Leptin等。說明垂體腺瘤產(chǎn)生侵襲性是一個(gè)多環(huán)節(jié)(Multiple Hit)的過程，是許多分子參與、誘導(dǎo)而成的整體效應(yīng)，而非單一因素或個(gè)別途徑誘發(fā)形成。 第二部分CD44v6、CXCL12、CXCR4、Ki-67、Galectin-3及 CD105在人垂體腺瘤中聯(lián)合表達(dá)的水平 目的：研究垂體腺瘤侵襲與侵襲相關(guān)因子表達(dá)的關(guān)系：粘附因子 CD44v6、趨化因子C

5、XCL12及其受體CXCR4、增殖細(xì)胞相關(guān)核抗原 Ki67、Galectin-3及CD105在人侵襲性垂體腺瘤及非侵襲性垂體腺瘤中聯(lián)合表達(dá)的水平及臨床意義。 方法：19例垂體腺瘤組織標(biāo)本取自經(jīng)蝶或開顱手術(shù)，利用差異蛋白和相對(duì)應(yīng)的單克隆抗體，富集侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤組織及外周血循環(huán)白細(xì)胞。再利用免疫熒光和免疫組化技術(shù)研究差異蛋白在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤上的表達(dá)分布，同時(shí)利用流式細(xì)胞儀檢測差異蛋白在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤及外

6、周血循環(huán)白細(xì)胞在手術(shù)前后的表達(dá)差異。從而將創(chuàng)新的方法與傳統(tǒng)的MRI技術(shù)、HE染色技術(shù)、激素水平測定及免疫組化技術(shù)應(yīng)用侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤的研究，以便為侵襲性垂體腺瘤的體外研究提供依據(jù)。 結(jié)果：侵襲組(20.51±7.98)與非侵襲組(7.52±2.6)間CD44v6的表達(dá)水平存在顯著性差異(P<0.05)；而Ki-67、Galectin-3、CXCL12、CXCR4及CD105在兩組間不存在顯著性差異(P>0.05)。在侵襲

7、組內(nèi)部，Ki-67的表達(dá)水平在侵襲海綿竇組(7.3±2.0)與侵襲鞍底組(16.8±4.2)之間存在顯著性差異(P<0.05)。而CD105在侵襲海綿竇組(14.7±3.8)的表達(dá)高于侵襲鞍底組(5.25±2.2)(P<0.05)。CXCR4在侵襲海綿竇組(3.8±1.4)的表達(dá)水平低于侵襲鞍底組(6.75±1.0)(P<0.05)。 結(jié)論：可以初步推斷CD44v6與垂體腺瘤的侵襲性存在密切關(guān)系?？赡茏鳛榇贵w腺瘤侵襲性的標(biāo)記物之