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1、目的:垂體腺瘤是一種臨床常見(jiàn)的良性顱內(nèi)腫瘤,發(fā)病率大約為1/10萬(wàn)~7/10萬(wàn),約占顱內(nèi)腫瘤的10%-15%,僅次于膠質(zhì)瘤和腦膜瘤。垂體腺瘤一般呈局限性生長(zhǎng),但部分垂體腺瘤的生長(zhǎng)可呈侵襲性,即侵襲性垂體腺瘤。侵襲性垂體腺瘤是指腫瘤生長(zhǎng)侵襲周圍的硬膜、血管、神經(jīng)、海綿竇、鞍區(qū)骨質(zhì)等,手術(shù)全切除十分困難,導(dǎo)致術(shù)后腫瘤殘余和較高的復(fù)發(fā)率,患者預(yù)后較差。垂體腺瘤的侵襲性是針對(duì)垂體腺瘤治療上的一個(gè)熱點(diǎn)和難點(diǎn)。
目前針對(duì)垂體腺瘤侵襲性
2、的診斷多依靠患者臨床癥狀,影像學(xué)檢查腫瘤有無(wú)破壞顱底骨質(zhì)、侵犯海綿竇、包繞頸內(nèi)動(dòng)脈、視神經(jīng)受壓程度等,術(shù)中觀察有無(wú)侵犯硬膜、骨質(zhì)、視神經(jīng)、頸內(nèi)動(dòng)脈等以及術(shù)中活檢硬膜或鞍區(qū)骨質(zhì)。但上述方法仍然存在較大的局限性,尤其腫瘤早期,瘤體較小的侵襲性垂體腺瘤,僅憑上述標(biāo)準(zhǔn)難以作出正確的診斷,而不能采取積極有效的綜合治療措施。
骨橋蛋白(osteopontin,OPN)是一種磷酸化的分泌性蛋白,其受體包括整合素和CD34受體。大量研究證
3、實(shí),OPN與許多腫瘤的大小、生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和預(yù)后等有關(guān),是一種新的腫瘤標(biāo)記物?;|(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中分子量最大且最重要的蛋白酶,其底物主要有Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原、明膠及彈性纖維組成。MMP-9能夠破壞細(xì)胞基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM),維持ECM的生理動(dòng)態(tài)平衡,從而促進(jìn)腫瘤的侵潤(rùn)與轉(zhuǎn)移。在顱內(nèi)腫瘤尤其垂體腺瘤的發(fā)生及侵襲過(guò)程中起著重要作用,在判斷垂體腺
4、瘤的侵襲性方面具有也有特異性。腫瘤生長(zhǎng)依賴于血管生成,微血管密度(microvessel density,MVD)計(jì)數(shù)被認(rèn)為是能反映腫瘤血管生成的一個(gè)指標(biāo),也是反映腫瘤生物學(xué)行為的一個(gè)重要指標(biāo)。MVD與實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)、復(fù)發(fā)及預(yù)后密切相關(guān),MVD值增高提示預(yù)后往往不良。
本試驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)侵襲性垂體腺瘤和非侵襲性垂體腺瘤中OPN、MMP-9及MVD表達(dá)水平的差異,初步研究OPN、MMP-9、MVD三者與垂體腺瘤及
5、其侵襲性的關(guān)系,探討三者之間的相關(guān)性,為今后垂體腺瘤的診斷、治療及預(yù)后提供一條可能的新途徑。
材料和方法:收集來(lái)自于2006年10月至2007年8月間河北醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)切除的30例垂體腺瘤和3例腦外傷減壓術(shù)正常腦組織標(biāo)本。30例垂體腺瘤標(biāo)本中,女性19例,男性11例。年齡16~69歲,平均年齡42歲。依據(jù)術(shù)前影像學(xué)檢查及術(shù)中觀察腫瘤組織有無(wú)侵犯鄰近結(jié)構(gòu),將30例垂體腺瘤分為侵襲性組17例,非侵襲性組13例
6、。
應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法對(duì)30例垂體腺瘤和3例正常腦組織標(biāo)本中OPN、MMP-9及MVD的表達(dá)分別進(jìn)行檢測(cè),主要包括標(biāo)本固定、蠟塊包埋、組織切片;脫蠟和水化;抗原修復(fù);滴加一抗;滴加二抗;脫水、透明、封片、鏡檢。
實(shí)驗(yàn)測(cè)得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示。應(yīng)用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,其中OPN、MMP-9分別采用Crosstabs Test(卡方檢驗(yàn)),MVD采用Independent-Samp
7、les TTest(獨(dú)立樣本T檢驗(yàn))。OPN、MMP-9之間的相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。OPN與MVD、MMP-9與MVD之間的相關(guān)性分別作直線相關(guān)回歸分析,并用t檢驗(yàn)分別檢測(cè)其顯著性。檢驗(yàn)水準(zhǔn):α=0.05。
結(jié)果:OPN在正常腦組織中呈陰性表達(dá),腫瘤細(xì)胞中OPN的表達(dá)主要定位于細(xì)胞胞漿,非侵襲性垂體腺瘤和侵襲性垂體腺瘤中均有表達(dá),且侵襲性垂體腺瘤明顯高于非侵襲性垂體腺瘤(X2=6.652,P<0.01);
8、MMP-9在正常腦組織中呈陰性表達(dá),腫瘤細(xì)胞中MMP-9的表達(dá)主要定位在腫瘤細(xì)胞胞質(zhì),MMP-9在侵襲性垂體腺瘤組中的表達(dá)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤組(X2=8.167,P<0.01);在腫瘤細(xì)胞中FactorⅧ抗體的陽(yáng)性染色位于血管內(nèi)皮細(xì)胞上,侵襲性垂體腺瘤組的MVD計(jì)數(shù)顯著高于非侵襲性垂體腺瘤組(t=3.581,P<0.01)。在侵襲性垂體腺瘤中OPN與MMP-9的表達(dá)具有顯著相關(guān)性(rs=0.813,p<0.01);侵襲性垂體腺瘤中
9、OPN表達(dá)與MVD計(jì)數(shù)之間具有顯著相關(guān)性(r=0.716,p<0.01);同時(shí)侵襲性垂體腺瘤中MMP-9的表達(dá)與MVD計(jì)數(shù)也具有顯著相關(guān)性(r=0.783,p<0.01)。
結(jié)論:侵襲性垂體腺瘤組與非侵襲性垂體腺瘤組在性別及平均年齡上無(wú)顯著差異:P>0.05。
1、與非侵襲性垂體腺瘤相比,在侵襲性垂體腺瘤組中OPN、MMP-9均呈高表達(dá)且兩者之間有相關(guān)性,說(shuō)明OPN、MMP-9共同參與了垂體腺瘤侵襲性,具有協(xié)
10、同作用。
2、侵襲性垂體腺瘤組中MVD計(jì)數(shù)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤組,提示垂體腺瘤的侵襲性與血管生成密切相關(guān)。侵襲性垂體腺瘤中OPN、MMP-9的表達(dá)與MVD計(jì)數(shù)呈正相關(guān),提示OPN、MMP-9可能通過(guò)參與了腫瘤微血管的生成,從而促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)與侵襲。
3、OPN、MMP-9、MVD與垂體腺瘤的侵襲性密切相關(guān),一定程度上可作為評(píng)價(jià)垂體腺瘤侵襲性及其預(yù)后的輔助指標(biāo),通過(guò)檢測(cè)手術(shù)切除的垂體腺瘤標(biāo)本中OPN、MMP
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