EGFR、HeR-3肺腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)與培美曲塞耐藥關(guān)系的研究.pdf

1、中文摘要EGFR、Her～3在肺腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)與培美曲塞耐藥關(guān)系的研究捅要【目的】初步研究EGFR和HER一3基因在肺腺癌細(xì)胞株和培美曲塞誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞株中的表達(dá)變化。揭示EGFR和HER3基因表達(dá)情況與非小細(xì)胞肺癌培美曲塞耐藥可能的關(guān)系，為臨床個(gè)體化治療提供一定依據(jù)?！痉椒ā坑么髣┝颗嗝狼T導(dǎo)A549細(xì)胞成為耐藥細(xì)胞株A549／PEM，CCK一8法檢測(cè)兩種細(xì)胞的增殖抑制率，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其周期分布情況，實(shí)時(shí)熒光定量PCR分別檢測(cè)

2、EGFR與HER3mRNA在兩種細(xì)胞中的表達(dá)量。【結(jié)果】(1)CCK8法測(cè)得培美曲塞對(duì)A549細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)為34310％ol／L，經(jīng)過(guò)4個(gè)月藥物反復(fù)處理，成功誘導(dǎo)出耐藥指數(shù)為515倍的耐藥細(xì)胞株(A549／PEM)。(2)與A549細(xì)胞相比，A549／PEM處于G1／GO期的細(xì)胞增加，分別為(5625010)％和(6512040)％，處于S期的細(xì)胞減少，分別為(4087030)％和(3174040)％，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(

3、PO05)。(3)耐藥細(xì)胞株中EGFR和HER3基因的相對(duì)表達(dá)量(O64007，156O12)均高于親代細(xì)胞株(O55_008，129_003)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸005)?！窘Y(jié)論】EGFR和HER3基因在培美曲塞耐藥細(xì)胞株中的表達(dá)高于親代細(xì)胞株，這兩種基因表達(dá)量的改變可能與培美曲塞耐藥有一定相關(guān)性。這兩種基因的表達(dá)情況可能是預(yù)測(cè)培美曲塞治療肺腺癌療效的潛在指標(biāo)。碩士研究生：劉冰(腫瘤學(xué))指導(dǎo)教師：于壯副教授【關(guān)鍵詞】培美曲塞：肺腺癌

4、；EGFR；HER3目錄目錄弓I言1第一章材料和方法211實(shí)驗(yàn)材料2111細(xì)胞株2112主要儀器設(shè)備2113主要試劑3114主要液體配制gBgll312實(shí)驗(yàn)方法與步驟4121細(xì)胞培養(yǎng)4122誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞株5123流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布6124細(xì)胞總RNA的提取。6125熒光定量PCR反應(yīng)8126PCR反應(yīng)結(jié)果分析9127數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析10第二章結(jié)果1121人肺腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)1l22耐藥細(xì)胞株的誘導(dǎo)及耐藥指數(shù)的測(cè)定ll23細(xì)胞周期的分