羥基酪醇的分離純化及其對(duì)腦膠質(zhì)細(xì)胞HEB和腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251的凋亡作用機(jī)理研究.pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名( 簽字日期：“萬(wàn)緝／月c 髟日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解南昌

2、大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊( 光盤(pán)版) 電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》中全文發(fā)表，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。( 保密

3、的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))學(xué)位論文作者簽名( 手 導(dǎo)師簽名( 手寫(xiě)) ：簽字日期：幽咿拜鄉(xiāng)月，始 簽字日期： 沙，≥年鄉(xiāng)月，壚日摘要摘要羥基酪醇( H T ) ，化學(xué)名為3 , 4 - Z ．羥基苯乙醇，是一種環(huán)烯醚萜類羥基芳族化合物，具有脂溶性和水溶性物理學(xué)特性的醇臨二酚。在生物學(xué)方面已研究表明其具有抗氧化性、抗血小板聚集、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗癌和抗菌等活性。它作為橄欖油中的主要成分而在地中海一帶飲食健康中起到重要作用。腦膠質(zhì)瘤是

4、中樞神經(jīng)系統(tǒng)臨床常見(jiàn)疾病之一，它的治療在世界醫(yī)學(xué)屬于疑難病癥已被公認(rèn)。因其病理學(xué)上行為展現(xiàn)為浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，雖然顯微技術(shù)己廣泛運(yùn)用，但是用手術(shù)將其徹底切除仍達(dá)不到預(yù)期效果。替莫唑胺是目前治療腦膠質(zhì)瘤較為可信的藥物，但效果仍然不堪理想。新型、高效、低毒的抗膠質(zhì)瘤藥物的研發(fā)仍值得期待。本研究旨從橄欖苦苷粗提物或橄欖葉的鹽酸水解液中分離純化得到高純度的H T ，再進(jìn)一步研究其是否有誘導(dǎo)腦膠質(zhì)細(xì)胞H E B 和腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U 2 5 1 凋亡的效果

5、，從而探討其抗腦膠質(zhì)瘤的生物學(xué)活性。這將為橄欖葉及富含橄欖皂苷相關(guān)資源的合理充分利用提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)，為H T 在腫瘤預(yù)防與治療等運(yùn)用方面開(kāi)拓新視野。以下為實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)論概述：( 1 ) 用0 ．5M 的H C l 水解橄欖苦苷粗提物，水解條件為時(shí)間1 5 r a i n 、溫度1 0 5℃、料液比1 ／3 0 ，水解液經(jīng)過(guò)離心除雜后，設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)篩選出Z T C I + I ．I I 天然澄清劑的最佳澄清條件( B 組份和

6、A 組份的最終質(zhì)量濃度分別為O ．2 g ·L ～，0 ．1g ．L 一；水浴溫度為1 0 0 ℃；水浴時(shí)間為2h ) ，然后以此條件對(duì)水解液做澄清實(shí)驗(yàn)，以澄清后離心所得的干沉淀為依據(jù)，發(fā)現(xiàn)澄清三次效果較佳，用篩選出最佳的萃取劑乙酸乙酯萃取澄清液，濃縮后得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4 3 ．3 8 ％的H T ，回收率達(dá)到8 2 ．3 5 ％。( 2 ) 用0 ．5M 的H C l 水解橄欖葉粉末，水解條件、澄清條件和澄清次數(shù)與( 1 )相

7、同，用1 3 種大孔樹(shù)脂分別吸附澄清液中的有效成分，篩選出較佳的樹(shù)脂為L(zhǎng) X ．1 8 c ，然后用此種樹(shù)脂篩選澄清液吸附量，結(jié)果為1 gL X ．1 8 C 能吸附5 m L ，吸附率高達(dá)9 0 ．1 4 ％。最后用L X ．1 8 C 吸附分離后的樣再繼續(xù)用O D S 填料在A K T A T M p u r i f i e r 系統(tǒng)中進(jìn)一步分離。最后檢測(cè)發(fā)現(xiàn)能夠從橄欖葉中分離得到純度為4 7 ．8 2 ％的H T ，但回收率僅為1