唑來膦酸在預(yù)防兔激素性股骨頭壞死中對(duì)NPY、BGP與TRACP-5b表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本研究通過制造激素聯(lián)合內(nèi)毒素致兔股骨頭壞死模型,采用唑來膦酸進(jìn)行干預(yù),探討唑來膦酸在預(yù)防兔激素性股骨頭壞死中對(duì)NPY、BGP與TRACP-5b表達(dá)的影響,從而為唑來膦酸預(yù)防激素性股骨頭壞死的作用通路提供理論支持。
　　方法:選取70只28周齡雄性新西蘭大白兔,先以兔維持飼料實(shí)驗(yàn)性喂養(yǎng)7天。然后按照隨機(jī)對(duì)照原則分為3組,3組動(dòng)物體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。唑來膦酸組(A組):共30只,經(jīng)耳緣靜脈注射1次LPS(大腸桿菌內(nèi)毒素,10μ

2、g/kg),臀肌注射MPS(注射用甲潑尼龍琥珀酸鈉,20mg/kg),共3次,注射的時(shí)間間隔為24小時(shí),末次使用MPS后24小時(shí)開始經(jīng)耳緣靜脈注射唑來膦酸注射液,100μg/kg,共2次,時(shí)間間隔4周。模型組(B組):共30只,與A組在同一時(shí)間點(diǎn)、相同部位經(jīng)相同途徑注射相同劑量的LPS與MPS,由生理鹽水代替唑來膦酸注射液。空白對(duì)照組(C組):共10只,與A組在同一時(shí)間點(diǎn)、相同部位經(jīng)相同途徑注射相同劑量的生理鹽水,唑來膦酸注射液由生理鹽

3、水替代。觀察動(dòng)物的一般情況、死亡率并行及時(shí)搶救、補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等。A組和B組中的每只動(dòng)物均被從耳緣靜脈抽取5次血,具體抽血時(shí)間如下:耳緣靜脈注射LPS前3天、注射MPS后1周、2周、4周及6周。C組也在相同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行抽血。ELISA法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)血清中NPY、BGP和TRACP-5b的表達(dá)水平。使用SPSS17.0軟件對(duì)ELISA的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組內(nèi)自身前后對(duì)照比較及組間相同時(shí)間點(diǎn)比較采用單因素方差分析。第6周末,所有動(dòng)物均在

4、全身麻醉下行X線放射學(xué)檢查與MRI掃描,并經(jīng)MRI掃描評(píng)估股骨頭壞死情況。經(jīng)耳緣靜脈空氣栓塞處死動(dòng)物,取出股骨頭,觀察其形態(tài)、色澤及軟骨下骨外露情況等。行組織病理學(xué)檢查,評(píng)估空骨陷窩的發(fā)生率及股骨頭壞死的發(fā)生率。
　　結(jié)果:第6周末,A組和B組兩組動(dòng)物的死亡率分別為16.67％、20.00%。MRI掃描發(fā)現(xiàn),A組和B組股骨頭壞死率分別為10.00%、60.00%。A組自身前后對(duì)照比較:血清NPY水平逐漸降低;血清BGP水平逐漸下降

5、;血清TRACP-5b水平逐漸升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B組自身前后對(duì)照比較:血清NPY水平明顯降低;血清BGP水平明顯下降;血清TRACP-5b水平明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C組自身前后對(duì)照比較:血清NPY、BGP和TRACP-5b的水平雖略有波動(dòng),但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。A、B、C三組在相同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行組間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,B組中血清NPY、BGP水平最低且TRACP-5b水平最高,緊隨其后的是A組和C組。HE染色發(fā)現(xiàn),A、

6、B兩組空骨陷窩發(fā)生率(%)分別為44.25±18.74、61.75±13.59;A、B兩組的股骨頭壞死率(%)分別為16.67、76.67。
　　結(jié)論:
　　1.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)唑來膦酸對(duì)激素性股骨頭壞死的預(yù)防是通過上調(diào)血清中BGP與NPY的濃度水平,下調(diào)TRACP-5b的濃度水平實(shí)現(xiàn)的;
　　2.MRI在診斷激素性股骨頭壞死方面特異性強(qiáng),敏感度高,與組織病理學(xué)檢查相比具有高度一致性,可用于股骨頭壞死的藥物預(yù)防效果評(píng)估、早期