腹瀉型腸易激綜合征病人結(jié)腸粘膜胰蛋白酶改變及其對(duì)內(nèi)臟感覺的影響.pdf

1、目的：測(cè)定腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)病人升結(jié)腸肥大細(xì)胞的數(shù)量及類胰蛋白酶在結(jié)腸粘膜含量的改變，類胰蛋白酶對(duì)小鼠內(nèi)臟感覺和脊髓背角神經(jīng)遞質(zhì)(P物質(zhì)(SP)和降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)的影響，探討類胰蛋白酶在腹瀉型腸易激綜合征發(fā)病機(jī)理中的作用。
　　 方法：
　　 1、符合RomeⅢ診斷標(biāo)準(zhǔn)的IBS-D病人24例、健康志愿者12例，腸鏡檢查時(shí)于升結(jié)腸取粘膜組織4塊，采用甲苯胺藍(lán)染色法計(jì)數(shù)粘膜肥大細(xì)胞數(shù)量、采用ELIS

2、A法檢測(cè)結(jié)腸粘膜孵育上清液中類胰蛋白酶濃度，并與IBS-D病人胃腸道癥狀評(píng)分(GSRS)進(jìn)行相關(guān)分析。
　　 2、C57BL/6系雄性6-8周齡小鼠56只隨機(jī)分為7組，分別予健康對(duì)照組升結(jié)腸粘膜培養(yǎng)上清液100μl(A組)、IBS-D升結(jié)腸粘膜培養(yǎng)上清液100μl(B組)、IBS-D升結(jié)腸粘膜培養(yǎng)上清液100μl+絲氨酸蛋白酶抑制劑Fut-175(50μg/ml)(C組)、不同濃度類胰胰蛋白酶(0.6ng(D組)、2.2ng(E

3、組)、2.2 ng+Fut-175(F組))、生理鹽水灌腸(G組)。6小時(shí)后測(cè)定結(jié)腸氣囊擴(kuò)張時(shí)腹壁肌電變化；免疫組化法觀察腰骶部脊髓背角SP、CGRP表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：IBS-D病人升結(jié)腸MC數(shù)量(6.33±1.64)個(gè)/HP，健康對(duì)照組為(3.08±0.77)個(gè)/HP，差異有顯著性意義(P=0.000)。IBS-D病人升結(jié)腸粘膜組織類胰蛋白酶濃度為(0.072±0.023)ng/mg組織，健康對(duì)照組為(0.026±0.0

4、14)ng/mg組織，差異有顯著性意義(P=0.000)。類胰蛋白酶濃度與GSRS呈正相關(guān)(r=0.581，P=0.003)，而肥大細(xì)胞數(shù)量與類胰蛋白酶濃度(r=0.010，P=0.963)、及GSRS(r=0.209，P=0.326)無顯著相關(guān)性。
　　 各試驗(yàn)組小鼠在氣囊內(nèi)壓為15mmHg時(shí)腹壁肌電差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在氣囊內(nèi)壓為30、45、60mmHg時(shí)，B組的腹壁肌電幅值(27.50±5.23，41.69±5.80，54.

5、03±6.13uV)及E組(27.05±1.66，40.66±3.39，54.38±4.68 uV)較A組(22.49±3.43，31.45±3.62，47.68±5.78 uV)、C組(23.45±2.81，34.40±3.70，44.81±6.62 uV)、D組(22.92±3.31，33.81±3.73，45.73±6.16 uV)、F組(20.94±3.17，34.08±4.67，43.02±4.34 uV)、G組(22.24±

6、3.49，32.67±6.99，47.82±6.79 uV)高(P均＜0.05)。B組脊髓背角SP、CGRP之IOD值(121.72±4.67，123.54±4.32)與E組SP、CGRP之IOD值(124.69±5.06，126.32±5.09)較A組(114.76±3.02，105.79±5.22)、C組(113.62±4.04，110.06±4.89)、D組(115.75±3.99，106.93±4.85)、F組(112.04±5

7、.92，107.79±5.43)、G組(114.74±3.90，110.59±4.63)高(P均＜0.05)。
　　 各試驗(yàn)組小鼠在氣囊內(nèi)壓為15mmHg時(shí)腹壁肌電差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.567＞0.05)。在氣囊內(nèi)壓為30、45、60mmHg時(shí)，B組及E組的腹壁肌電幅值較A、C、D、F、G組高(P均＜0.05)。B組及E組脊髓背角SP、CGRP之IOD值較A、C、D、F、G組高(P均＜0.05)。
　　 結(jié)論：IBS