2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立順鉑(cisplatin)誘導(dǎo)的大鼠急性腎損傷(acute kidney injury,AKI)和慢性纖維化實驗?zāi)P?應(yīng)用人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞(human umbilicalcord mesenchymal stem cells,hucMSCs)移植觀察其療效。采用免疫組織化學(xué)、病理學(xué)、分子生物學(xué)等技術(shù)找尋hucMSCs修復(fù)AKI和抗間質(zhì)纖維化的機(jī)制,為臨床應(yīng)用hucMSCs治療腎損傷提供有效的實驗依據(jù)。
   方法:大鼠

2、腎損傷模型的建立采用腹腔注射順鉑的方法,注射劑量為6mg/kg體重。在注射的0d、2d、5d、7d、10d采集大鼠尾靜脈血,測定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),并經(jīng)腎組織HE染色等評價急性腎損傷程度。分別于順鉑注射后1周、2周、3周、4周、6周和8周觀察慢性遷延性腎損傷,運用血清學(xué)、HE染色和Masson’s三色染色等評價慢性腎纖維化的形成。于順鉑注射后24h將2.0×106hucMSCs經(jīng)尾靜脈輸注入腎損傷大鼠模型,分別于損傷0d

3、、2d、5d、7d、10d、15d、21d、4周、6周、8周采集尾靜脈血檢測Cr、BUN,綜合運用分子生物學(xué)、免疫組織化學(xué)、病理學(xué)、定量RT-PCR、western blot等技術(shù),與未移植hucMSCs組對比,評價hucMSCs對AKI的治療效果并找尋修復(fù)機(jī)制;觀察hucMSCs能否通過對早期AKI的修復(fù)阻止后期的慢性腎纖維化的發(fā)生及其可能的機(jī)制。
   結(jié)果:hucMSCs移植組較對照組Cr、BUN水平顯著降低(p<0.05

4、);病理結(jié)果顯示移植組腎組織炎癥細(xì)胞浸潤及充血情況明顯好于對照組;TUNEL實驗結(jié)果顯示,hucMSCs能有效減低腎小管細(xì)胞的凋亡,而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)免疫組化結(jié)果則顯示hucMSCs可提高損傷部位腎小管上皮細(xì)胞的增殖能力;實時定量RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)移植組腎組織細(xì)胞凋亡相關(guān)基因caspase-3以及IL-1β、TNF-α等炎癥因子的mRNA表達(dá)降低。此外,hucMSCs移植能降低Bax的表達(dá),增加Bcl-2的表達(dá),從而降低Ca

5、spase3的活化,減少細(xì)胞凋亡;hucMSCs移植減少了細(xì)胞色素C(Cyt-C)從線粒體釋放到細(xì)胞漿中,并能抑制脂質(zhì)的過氧化,使丙二醛(MDA)的含量明顯降低,從而保護(hù)了腎細(xì)胞的線粒體。此外,順鉑損傷4周顯示明顯的腎間質(zhì)纖維化,Masson’s三色染色顯示hucMSCs移植后能明顯減少了腎臟間質(zhì)膠原的沉積:RT-PCR在mRNA水平上揭示α-SMA、vimentin、slug的表達(dá)降低,而E-cadherin的表達(dá)增加;用wester

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