節(jié)律基因Period2與放射敏感性的研究.pdf

1、腫瘤是一種死亡率極高的人類疾病。通常治療腫瘤的方法主要有三種，手術治療、化療和放射治療，每一種療法都有自己的優(yōu)缺點。在腫瘤治療沒有出現(xiàn)更多更有效的治療方法的情況下，如何提高現(xiàn)有療法的治療效果，降低副作用有著迫切的需要。 時間生物學的研究表明，人的很多生命活動也具有一定的節(jié)律。在各種不同周期的節(jié)律當中，近日節(jié)律是最引人注意，被研究最多的。Cicadian，是一個最近幾十年才出現(xiàn)的詞。它被用來描述周期大概為24小時的節(jié)律。人類有很多

2、節(jié)律活動的周期接近24小時。 臨床研究發(fā)現(xiàn)，生物節(jié)律異常改變可以增高腫瘤的發(fā)生率。很多上夜班的婦女有更高患乳腺癌的機率。根據(jù)腫瘤生長代謝具有時間生物學的特點，ELevis等采用擇時化療，在腫瘤時間治療方面取得可喜的進展。其結果是，使得對腫瘤細胞的殺傷最大，對正常組織的損傷最小。那么在放療當中是不是也適用這一原理呢。結果是肯定的。所以我們也可以選擇一個最合適的時間點來給與放療，在這個時間點腫瘤細胞相對于正常細胞對射線有更大的敏感性

3、。 本研究當中，我們主要研究了尋找一個合適的指針來指示什么是最好的時間，對腫瘤殺傷最多，對正常組織傷害最小。同時也進一步進行了機制研究。 近年來，人們對于近日節(jié)律產(chǎn)生的機制了解得越來越多。隨著很多近日節(jié)律基因的克隆完成，大家一致達成共識，這些近日節(jié)律基因及其產(chǎn)物是生物體產(chǎn)生近日節(jié)律振蕩的分子基礎。這些基因的轉錄翻譯的24小時變化可以被用來作為指示生物體近日節(jié)律變化的指針。Period2是近日節(jié)律基因家族的重要一員，而且最

4、近發(fā)現(xiàn)，Period2和腫瘤的發(fā)生發(fā)展有很大的關系。 我們首先外源性的誘導體外培養(yǎng)的正常細胞產(chǎn)生近日節(jié)律振蕩。然后用以放射治療的研究。我們在period2表達處于峰值和谷值的時候給與射線照射。我們通過流式細胞術和克隆形成實驗的結果發(fā)現(xiàn)，不同組細胞的凋亡率、細胞周期分布和細胞的生長能力具有顯著性的差異。所以我們推測，Period2的表達水平度對射線的有效性具有很大的影響。但是在Period2變化的同時，其他的節(jié)律基因也在同時發(fā)生變

5、化，有些還和Period2有同樣的位相。這就是說，也許Period2并不是起直接影響腫瘤的作用，可能只是作為一個指示者。 我們進一步將Period2真核表達質粒轉染入體外培養(yǎng)細胞中，增加這些細胞的Period2表達。射線照射處理后，我們發(fā)現(xiàn)Period2高表達的細胞與對照組細胞相比，其凋亡率、細胞周期分布和細胞的生長能力具有顯著性的差異。 對于出現(xiàn)這樣的結果，我們對DNA損傷修復有關的基因進行了研究，發(fā)現(xiàn)Rad50、Mr

6、ell和Nbsl基因在電離輻射造成的DNA損傷修復中發(fā)揮重要作用，我們檢測了它們的表達水平。所有實驗組的Rad50表達沒有明顯差異，這與文獻報道的rad50表達穩(wěn)定的結果相符。在實驗結果同時表明Mrell和NbslmRNA水平在三個實驗組中是有差異的，其中Period2峰值照射組細胞的mrell和NbslmrnA水平最高，說明該組細胞的DNA損傷修復水平在三組中最高，初步證實了我們對于Period2可能影響DNA損傷修復途徑的推論。部分