小鼠多巴胺能神經(jīng)元慢性損傷過(guò)程中凋亡相關(guān)蛋白BCL-2與BAD的表達(dá).pdf

1、目的:帕金森氏病(Parkinson's disease,PD)是一種嚴(yán)重危害人類健康的中樞神經(jīng)退行性疾病,現(xiàn)已證實(shí)PD的主要病理變化為患者中腦黑質(zhì)致密部多巴胺(dopamine,DA)能神經(jīng)元的進(jìn)行性變性死亡,從而導(dǎo)致黑質(zhì)紋狀體系統(tǒng)DA的產(chǎn)量減少,紋狀體DA供應(yīng)不足。如何闡明或阻止DA能神經(jīng)元的變性死亡,仍是當(dāng)前PD治療研究的熱點(diǎn)之一。因此,積極探索DA能神經(jīng)元的保護(hù)措施及其機(jī)制,有著極其重要的醫(yī)學(xué)價(jià)值和社會(huì)意義。本研究的主要目的是觀

2、察在MPTP慢性損傷小鼠DA能神經(jīng)元的過(guò)程中,小鼠行為學(xué)變化,凋亡相關(guān)蛋白BCL-2與BAD的表達(dá)情況,以及黑質(zhì)部DA能神經(jīng)元的功能情況。
　　 方法:(1)C57BL/6雄性小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(MPTP組)和生理鹽水對(duì)照組(NS組)兩大組,每大組又分為(給藥前組,給藥后1周,2周,3周,4周,5周)6小組。(2)腹腔注射MPTP,25mg/kg每周2次,連續(xù)五周;NS組每次給予等量生理鹽水。給藥前一周,以及每周第二次給藥后測(cè)試

3、行為學(xué)變化。(3)采用免疫熒光組織化學(xué),Western blot技術(shù),檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)BCL-2與BAD蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:(1)行為學(xué)懸掛實(shí)驗(yàn),MPTP組隨給藥時(shí)間懸掛測(cè)試評(píng)分逐漸下降,MPTP組第三周給藥以后與NS組比較(P＜0.05);行為學(xué)跳臺(tái)實(shí)驗(yàn),小鼠學(xué)習(xí)記憶能力隨給藥次數(shù)及時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸下降(2)BCL-2,BAD蛋白陽(yáng)性神經(jīng)元在小鼠黑質(zhì)致密部存在表達(dá),BCL-2和BAD蛋白在給予MPTP(給藥前,給藥后1周,

4、2周)后變化不明顯,到第3w后BCL-2蛋白含量逐漸下降(P＜0.05),BAD蛋白含量逐漸上升(P＜0.05)。(3)TH與BCL-2和BAD蛋白的相關(guān)分析,TH與BCL-2蛋白的表達(dá)之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.833,P＜0.01),而TH蛋白與BAD蛋白的表達(dá)之間存在顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=0.883,P＜0.01)。
　　 結(jié)論:在小鼠DA能神經(jīng)細(xì)胞慢性損傷過(guò)程中,存在BCL-2和BAD蛋白的表達(dá),其表達(dá)量和相互關(guān)系的變