整合素連接激酶在白蛋白誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:
　　 研究整合素連接激酶(integrin-linked kinase,ILK)在白蛋白誘導(dǎo)人近端腎小管上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)變(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)過(guò)程中的表達(dá),以及與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)之間的關(guān)系。
　　 方法:
　　 以體外培養(yǎng)的人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)為研究對(duì)象,分為空白對(duì)照

2、組(DMEM)、白蛋白誘導(dǎo)組(DMEM+人純化白蛋白5mg/ml)、TGF-β1中和抗體對(duì)照組(DMEM+TGF-β1中和抗體5ug/ml)、TGF-β1中和抗體拮抗組(DMEM+人純化白蛋白5mg/ml+TGF-β1中和抗體5ug/ml)。HK-2細(xì)胞在上述處理因素下分別培養(yǎng)oh、12h、24h、48h后,在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化；以RT-PCR法檢測(cè)α-SMA mRNA、ILK mRNA、TGF-β1mRNA、FN mRN

3、A的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 5mg/ml白蛋白作用HK-2細(xì)胞0～48h后ILK、TGF-β1、FN、α-SMAmRNA的表達(dá)水平逐漸增高,顯著高于空白對(duì)照組(P<0.01)；在使用TGF-β1中和抗體拮抗TGF-β1作用后,明顯抑制白蛋白誘導(dǎo)的TMET和ILK mRNA的表達(dá)(P<0.01)。相關(guān)性分析顯示,ILK mRNA表達(dá)與TGF-β1、FN、α-SMA mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.944、0.989、0.