牙本質(zhì)通透性的測(cè)定及其應(yīng)用研究.pdf

1、近年來(lái),隨著口腔醫(yī)學(xué)的發(fā)展,越來(lái)越多的新型牙科材料如脫敏劑、充填材料等出現(xiàn)并應(yīng)用于臨床。這些材料在臨床應(yīng)用前,要考慮對(duì)牙髓的刺激性,這與材料相接觸的牙本質(zhì)的通透性和材料本身的生物相容性有關(guān)。牙本質(zhì)的通透性過(guò)大時(shí),就出現(xiàn)了牙本質(zhì)敏感癥。影響牙本質(zhì)通透性的因素眾多,體內(nèi)測(cè)定困難。因此本研究模擬體內(nèi)情況,采用體外灌注法測(cè)定牙本質(zhì)的通透性并探討其應(yīng)用,設(shè)計(jì)并實(shí)施了以下實(shí)驗(yàn):
　　目的:
　　體外比較不同測(cè)試條件及不同部位人牙本質(zhì)的通

2、透性,并通過(guò)牙本質(zhì)通透性的變化來(lái)評(píng)價(jià)脫敏材料的療效,同時(shí)將牙本質(zhì)的通透性運(yùn)用到體外細(xì)胞毒性測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,研究牙本質(zhì)通透性對(duì)牙科材料細(xì)胞毒性的影響,為今后更好的選擇牙科修復(fù)材料提供實(shí)驗(yàn)參考。
　　方法:
　　1.牙本質(zhì)通透性的體外測(cè)定
　　用低速鋸切取人離體下頜第三磨牙牙合側(cè)近髓、中間及頰側(cè)近髓、中間牙本質(zhì)片,表面經(jīng)過(guò)碳化硅水砂紙打磨,超聲清洗后測(cè)定各牙片基線(xiàn)通透值。經(jīng)酸蝕處理后,采用灌注法分別在不同液壓,不同滲透液體條件

3、下測(cè)定其通透值;并用金相顯微鏡觀察各部位牙本質(zhì)小管密度,分析通透值與牙本質(zhì)小管密度間的相關(guān)性。
　　2.脫敏材料對(duì)牙本質(zhì)通透性的影響
　　用低速鋸切取人離體下頜第三磨牙牙合側(cè)近髓牙本質(zhì)片60個(gè),表面經(jīng)過(guò)碳化硅水砂紙打磨,超聲清洗,吹干表面水分。牙本質(zhì)片遠(yuǎn)髓面用350g/L磷酸處理30s,處理后所有試樣隨機(jī)分為三組,用體外灌注法測(cè)定三組牙本質(zhì)片基線(xiàn)通透值。三種脫敏材料:極固寧、Gluma和舒適達(dá)修復(fù)牙膏,分別測(cè)定脫敏材料使用后

4、的通透值,并用SEM觀察牙本質(zhì)表面形貌。
　　3.牙本質(zhì)通透性在牙科充填材料體外細(xì)胞毒性測(cè)定中的應(yīng)用
　　選取前期試驗(yàn)中通透值相近的頰側(cè)近髓牙本質(zhì)片,96孔濾膜滲透板片切為每條含有8個(gè)孔(嵌入井)的濾膜滲透裝置,去除濾膜后以頰側(cè)近髓牙本質(zhì)片代替,用醫(yī)用生物膠將牙本質(zhì)片緊密粘固在嵌入井底,將含有牙本質(zhì)片的嵌入井置入96孔板內(nèi),制備以牙本質(zhì)為屏障的體外細(xì)胞培養(yǎng)裝置。常用的5種牙科充填材料按要求制備為10mm×10mm×1mm的試

5、樣塊,將試樣浸入含100ml/LFBS的RPMI1640培養(yǎng)液內(nèi)(液量與試樣表面積之比為10ml/cm2),37℃靜置24h后,取每種材料浸提液稀釋為50％濃度。采用浸提液法和牙本質(zhì)屏障法對(duì)5種牙科材料進(jìn)行細(xì)胞毒性測(cè)定,并通過(guò)細(xì)胞形態(tài)觀察及細(xì)胞活性檢測(cè)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
　　結(jié)果:
　　1.牙本質(zhì)表面經(jīng)酸蝕處理后,其通透值均顯著大于未酸蝕的對(duì)照組(P<0.05),其中酸蝕30s的通透值增加最顯著,與酸蝕60s的牙本質(zhì)相比差異亦有

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。100cm液壓測(cè)定的通透值明顯大于32cm液壓(P<0.05);稀釋牛血清測(cè)得的通透值明顯小于蒸餾水和生理鹽水(P<0.05),蒸餾水與生理鹽水相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);牙合側(cè)牙本質(zhì)通透值明顯大于頰側(cè),近髓牙本質(zhì)通透值明顯大于中間(P<0.05);牙本質(zhì)通透值與其小管密度呈顯著正性相關(guān)(P<0.05)。
　　2.三種脫敏材料使用后牙本質(zhì)通透值均顯著低于使用前(P<0.05),通透值由低到高依次為

7、:極固寧≈Gluma<舒適達(dá)專(zhuān)業(yè)修復(fù)牙膏(P<0.05)。SEM觀察到,三種脫敏材料均可不同程度的堵塞牙本質(zhì)小管,降低牙本質(zhì)的通透值。
　　3.浸提液法結(jié)果為:高濃度氧化鋅丁香油水門(mén)汀浸提液組,細(xì)胞密度減少、形態(tài)異常,幾乎全部萎縮呈圓形;低濃度氧化鋅丁香油水門(mén)汀浸提液組,可見(jiàn)少許細(xì)胞呈梭形,但細(xì)胞伸展較差。牙本質(zhì)屏障法中氧化鋅丁香油水門(mén)汀組,大部分細(xì)胞呈不規(guī)則三角形或梭形,有少許細(xì)胞形態(tài)異常。相同濃度浸提液組,各組材料細(xì)胞毒性由底

8、到高順序均為:氫氧化鈣水門(mén)汀≈玻璃離子水門(mén)汀<復(fù)合樹(shù)脂<磷酸鋅水門(mén)汀<氧化鋅丁香油水門(mén)汀(P<0.05)。牙本質(zhì)屏障法中,各組材料細(xì)胞毒性由底到高順序?yàn)?氫氧化鈣水門(mén)汀≈玻璃離子水門(mén)汀<氧化鋅丁香油水門(mén)汀<復(fù)合樹(shù)脂<磷酸鋅水門(mén)汀(P<0.05)。牙本質(zhì)屏障法得到5種材料的細(xì)胞增殖率均高于浸提液法,其中氧化鋅丁香油水門(mén)汀組尤為顯著,為(89.1±3.6)%,等級(jí)評(píng)分顯示用浸提液法測(cè)得氧化鋅丁香油水門(mén)汀組細(xì)胞毒性呈重度,而用牙本質(zhì)屏障法測(cè)得

9、細(xì)胞毒性呈輕度。
　　結(jié)論:
　　1.牙本質(zhì)表面用350g/L磷酸酸蝕30s,可以去除玷污層,且不會(huì)明顯擴(kuò)大牙本質(zhì)小管。不同部位牙本質(zhì)的通透性不同,牙合側(cè)牙本質(zhì)通透性大于頰側(cè),近髓牙本質(zhì)通透性大于中間,且牙本質(zhì)的通透性與其小管密度密切相關(guān)。測(cè)試液體影響牙本質(zhì)的通透性。
　　2.三種脫敏材料均可不同程度的堵塞牙本質(zhì)小管,有效降低牙本質(zhì)的通透值,其中以極固寧和Gluma降低通透值效果最好。SEM觀察材料堵塞牙本質(zhì)小管的方法