野生山葡萄中白藜蘆醇的提取分離及其抗氧化性質(zhì)測(cè)定.pdf

1、本課題先以野生山葡萄為原料，研究了提取、分離白藜蘆醇的方法與條件，建立了最佳提取工藝與純化工藝，然后初步鑒定了白藜蘆醇的結(jié)構(gòu)，并測(cè)定其含量，最后簡(jiǎn)單研究了白藜蘆醇作為抗氧化劑在豬油中的應(yīng)用及其在自由基反應(yīng)體系中清除自由基的能力，這些都為白藜蘆醇在保健食品中的應(yīng)用打下了良好的基礎(chǔ)。 以野生山葡萄皮為原料，采用超聲波輔助法，通過有機(jī)溶劑的提取，得到白藜蘆醇粗提液。通過正交試驗(yàn)，采用60％甲醇溶液作為溶劑，提取最佳條件為浸提溫度60℃

2、，浸提時(shí)間40min，料液比為1：40，浸提兩次，達(dá)到最佳浸提效果。 然后對(duì)白藜蘆醇的純化進(jìn)行了研究，以NKA-Ⅱ，NKA-9和D101三種大孔吸附樹脂做為吸附劑，進(jìn)行柱層析。結(jié)果表明由NKA-9大孔吸附樹脂填充的色譜柱為試驗(yàn)中的最佳吸附樹脂，具有較好的選擇吸附性，易于觀察，解吸率高。其動(dòng)態(tài)飽和吸附量約為2.31mg/mL濕樹脂。最佳吸附條件：上樣濃度3～4mg/mL，上樣速率1mL/min，上樣量0.5BV，pH值為4;解吸采

3、用75％甲醇，解吸流速1mL/min，pH值為8時(shí)可以將白藜蘆醇較好的純化。 利用白藜蘆醇具有一定特征的顏色反應(yīng)，定性的測(cè)定樣品中含有白藜蘆醇。并利用紫外光譜掃描，定性的鑒定白藜蘆醇。在200～400nm光譜范圍內(nèi)對(duì)樣品進(jìn)行掃描，然后和白藜蘆醇的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對(duì)照，結(jié)果樣品與標(biāo)準(zhǔn)譜圖一致在308nm處有吸收峰。利用高效液相色譜法測(cè)定野生山葡萄皮中白藜蘆醇的含量。應(yīng)用乙腈-水(26：74)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為303nm，柱溫為35℃

4、，色譜柱C-18(250mm×4.6mm,5μm)。結(jié)果顯示野生山葡萄皮中自藜蘆醇含量為156.197μg/g。 最后研究了白藜蘆醇的抗氧化性質(zhì)。主要對(duì)白藜蘆醇對(duì)豬油抗氧化性質(zhì)的能力和消除氧自由基、羥自由基、超氧自由基的能力進(jìn)行分析。得出結(jié)論：白藜蘆醇具有抗氧化能力，并且隨著濃度的增大其抗氧化能力也逐漸增強(qiáng)。白藜蘆醇對(duì)豬油具有較強(qiáng)的抗氧化作用，且具有劑量效應(yīng)關(guān)系;提取物濃度達(dá)1％時(shí)的抗氧化活性在短時(shí)間(2d)內(nèi)與0.02％BHT