多發(fā)性骨髓瘤易感基因和分子預后標記的相關性研究.pdf

1、第一章 TNF-α基因啟動子區(qū)多態(tài)性與多發(fā)性骨髓瘤相關性及對沙利度胺聯(lián)合地塞米松治療方案骨髓瘤患者預后的影響
　　 背景及目的：盡管腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）啟動子區(qū)-238和-308單苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）被認為是功能性的多態(tài)性位點，然而它與多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）]的患病風險目前

2、仍無一致的結論。大大提高治療效果的新藥-沙利度胺通過影響TNF-α的生成，減少NF-k B的活化發(fā)揮抗骨髓瘤作用。因此本研究旨在觀察TNF-α啟動子區(qū)-238和-308多態(tài)性與多發(fā)性骨髓瘤發(fā)病風險的相關性及評估其多態(tài)性對沙利度胺聯(lián)合地塞米松治療方案的刪患者療效及預后影響。
　　 方法：采用聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）-限制性片段長度多態(tài)性（restriction fragment l

3、ength polymorphism，RFLP）方法檢測了中國漢族210例多發(fā)性骨髓瘤患者和218例健康對照者的TNF-α啟動子區(qū)-238和-308位點多態(tài)性狀態(tài)，同時應用單變量和多變量分析方法評估98例接受沙利度胺聯(lián)合地塞米松治療方案的MM患者療效及預后。
　　 結果：TNF-α基因-308位點的GA基因型和GA+AA基因型降低MM的患病風險，差異有顯著性P=0.01和P=0.02，是一種保護性的因素（OR0.51和0R0.5

4、5）。當聯(lián)合TNF-α-238和TNF-α-308位點SNP基因型分析時，GG/GA基因型減少MM的發(fā)生風險（P=0.03）。TNF-α-238位點GA+AA基因型較GG型患者具有長的無進展生存時間（progression-free survival，PFS，P=0.009）和更長的總生存時間（overallsurvival，OS，P=0.088）。結合患者年齡、β2-M，TNF-α-238和-308基因型的多因素分析中，TNF-α-2

5、38具有獨立的良好PFS預后意義（P=0.048）。然而，TNF-α-308的多態(tài)性狀態(tài)無論在單因素及多因素分析中，均未觀察到對治療效果及預后的影響。
　　 結論：TNF-α基因啟動子區(qū)-308位點多態(tài)性與多發(fā)性骨髓瘤疾病相關，可降低MM患病風險；而TNF-α-238多態(tài)性GA+AA基因型對沙利度胺具有良好的療效，并延長PFS和OS。因此，TNF-α基因啟動子區(qū)多態(tài)性可作為潛在的評估骨髓瘤疾病患病風險及沙利度胺治療刪療效和預后的

6、分子標記。
　　 第二章NF-k B信號通路相關基因多態(tài)性對多發(fā)性骨髓瘤疾病及基于硼替佐米治療方案患者預后的影響
　　 背景及目的：NF-κB是一組具有特殊DNA結合序列的轉(zhuǎn)錄因子，在MM細胞的周期調(diào)節(jié)、細胞生存、抗凋亡、細胞因子的產(chǎn)生等方面發(fā)揮重要作用。目前，通過阻斷NF-κB通路為作用靶點的蛋白酶體抑制劑-硼替佐米（Bortezomib）已廣泛應用于臨床，大大提高了MM患者的反應率及生存期，然而所有患者都將最終復發(fā)、

7、耐藥，導致無法治愈。本研究旨在通過對NF-κB信號通路上的關鍵分子，IκBα、NFκB2和TRAF3基因的多態(tài)性位點檢測，觀察其與MM疾病發(fā)病的相關性，同時評估對基于硼替佐米治療的MM患者預后的影響。
　　 方法：根據(jù)NCBI及HapMap中基因標簽所記錄的最小等位基因頻率（minor allelefrequency，MAF）在中國漢族人群比例>5％的原則，挑選IKBa、NFκB2和TRAF3基因26個SNP位點，采用飛行時間質(zhì)

8、譜（matrix assisted laser desorption ionizationtime of fl ight，MALDI-TOF）分析技術，對中國漢族215例MM患者和208例健康者進行檢測，同時評估上述位點多態(tài)性狀態(tài)對基于硼替佐米治療方案的94例骨髓瘤患者預后的影響。
　　 結果：在所有檢測位點中，去除不符合哈-溫平衡（Hardy-Weinberg eguiliberum，HWE）及多態(tài)性基因型頻率太少的3個位點（

9、rs10131139、rs8023164和rs12435483），余下23個位點中，Iκ Bα基因的rs2233406和rs2233409位點多態(tài)性基因型與疾病相關，T等位基因為保護性基因，其優(yōu)勢比（OR）及95％CI分別為0.623，0.394-0.984，（P=0.042）和0.638，0.386-1.056，（P=0.079）。TRAF3基因中rs7143468的A等位基因具有增加MM患病風險的可能性（OR1.539，95％CI：

10、0.968-2.448，P=0.068），而病例組中rs7143468A等位基因頻率明顯多于對照組（P=0.028），提示此類基因型可增加發(fā)病風險（OR1.539，95％CI：0.968-2.448，P=0.068），且病例組rs12147254的A等位基因發(fā)生頻率明顯少于健康組（33.5％vs51.0％，P<0.0001），因而降低疾病的發(fā)病風險。在單體型分析中，TRAF3基因單體型1[GAACAG]頻率在MM組明顯少于健康組，降低發(fā)

11、病風險（P<0.0001，OR0.526）。余下的IKBa、TRAF3基因位點及所有NF k B2位點均未觀察到多態(tài)性狀態(tài)與發(fā)病風險的相關性。
　　 TRAF3基因rs11160707位點GA+AA基因型較GG野生型PFS長（P=0.024）。NFκ B2基因rs12769316位點GA+AA基因型較GG野生型具有長的OS（P=0.038）；然而rs1056890位點CT+TT基因型較CC野生型其OS較短，表現(xiàn)預后不良（P=0.

12、018），這可能是由于rs12769316位點GA+AA基因型患者在接受基于硼替佐米治療方案時較野生型具有良好的總反應率（CR+VGPR+PR）（89.7％vs69.8％，P=0.038），而rs1056890多態(tài)性基因型的總反應率低于野生型（61.3％vs83.6％，P=0.018）。其余位點未觀察到多態(tài)性基因型與野生基因型在治療反應率及臨床預后之間的差異。我們從多變量分析結果發(fā)現(xiàn)TRAF3基因rs11160707是獨立的、良好的PF