鞘內(nèi)注射GDNF對神經(jīng)病理性疼痛大鼠的影響及可能機(jī)制.pdf

1、目的：觀察膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)對坐骨神經(jīng)結(jié)扎(CCI)大鼠機(jī)械和熱痛閾、脊髓背角磷酸化c-Jun氨基末端激酶(Phosphor-c-Jun N-terminalkinases,p-JNK)和磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(Phosphor-extracellularsignal-regulated kinase，p-ERK)表達(dá)的影響，探討GDNF對神經(jīng)病理性疼痛的影響及作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
　

2、　方法：健康雄性大鼠，體重200-220g，周齡6w，進(jìn)行鞘內(nèi)置管，取置管成功大鼠120只，隨機(jī)分為4組(n=30)∶對照組（C組）、假手術(shù)組（S組）、CCI組（P組）和GDNF組（G組）。除C組不予任何處理外，其他各組按De la Calle等的方法制備CCI模型，但S組只暴露坐骨神經(jīng)，不進(jìn)行結(jié)扎。S組和P組鞘內(nèi)注射生理鹽水10μl/次，隔日一次，至CCI術(shù)后14d;G組坐骨神經(jīng)結(jié)扎后鞘內(nèi)注射GDNF(Pepro Tech公司，美國)

3、2μ g/次，稀釋至10μl生理鹽水中，隔日1次，至術(shù)后14d。各組大鼠分別于CCI前、CCI后3、7、14d時，測定機(jī)械刺激縮足反射閾值(mechanical withdrawal threshold，MWT)和熱刺激縮足反射潛伏期(thermalwithdmwal latency，TWL)。取CCI術(shù)后3、7、14d各組大鼠的LA-6脊髓背角，采用蛋白質(zhì)印跡法(western blot)測定p-JNK蛋白和p-ERK蛋白的表達(dá)水平。

4、
　　結(jié)果：120只大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成，無傷口感染、肢體癱瘓及導(dǎo)管脫落等現(xiàn)象發(fā)生。坐骨神經(jīng)結(jié)扎大鼠均出現(xiàn)術(shù)側(cè)后瓜內(nèi)收、輕度外翻和跛行。與C組比較，S組機(jī)械和熱痛閾以及脊髓背角p-JNK和p-ERK表達(dá)無明顯差異(P＞0.05);與S組相較，P組在各個時間點(diǎn)機(jī)械和熱痛閾均明顯降低(P＜0.05)，而脊髓背角p-JNK和p-ERK表達(dá)量均明顯增加(P＜0.05）;G組在各個時間點(diǎn)機(jī)械和熱痛閾均高于P組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，但是仍低于S