自體骨髓源神經(jīng)干細胞移植治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的蛋白質組學分析.pdf

1、背景:戰(zhàn)爭創(chuàng)傷、交通意外、自然災害以及腦血管意外都會造成大量神經(jīng)系統(tǒng)損傷的患者,中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷預后較差,常給患者留下難以恢復的癥狀如截癱、偏癱、失語、視力障礙等。給患者本人生活造成極大的困難,給患者家庭帶來沉痛的負擔。中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的治療是神經(jīng)外科的一大難點,目前常規(guī)藥物以及物理療法效果不盡如人意。自體骨髓源神經(jīng)干細胞移植是治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的一個新的思路,具有廣闊的前景,但是目前神經(jīng)干細胞移植治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷早期療效不顯著,

2、不利于臨床觀察。而蛋白質組學的技術發(fā)展為解決此問題提供了一個新的方法,使用蛋白質組學技術分析腦脊髓損傷患者接受神經(jīng)干細胞移植術前組、接受神經(jīng)干細胞移植術后組、正常對照組以及假手術組患者腦脊液中的蛋白質組學的變化,進一步研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷患者腦脊液的蛋白質組學,并期望以此來評價神經(jīng)干細胞移植早期療效。
　　目的:
　　1.初步探討腦脊液蛋白質組學與神經(jīng)功能的關系。
　　2.進一步研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的腦脊液蛋白質組學。

3、
　　3.應用蛋白質組學的方法研究分析干細胞移植對中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的療效。
　　方法:
　　一.收集正常成人40例(組1,n=40,114標記)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷患者40例(組2,n=40,115標記)、以上患者術后一周時腦脊液(組3,n=40,116標記),以及神經(jīng)干細胞培養(yǎng)上清液5ml(組4,117標記);二.正常成人40例(組1,n=40,114標記),假手術組40例術前、術后(組5,n=40,分別用114、11

4、5標記),組內(nèi)等量混合后利用高效液相色譜柱去除高豐度蛋白,樣本經(jīng)iTRAQ試劑標記后利用二維色譜分離,經(jīng)串聯(lián)質譜鑒定以及相對定量,并從蛋白質數(shù)據(jù)庫中檢索蛋白質。
　　結果:
　　質譜得到的多肽片段,經(jīng)譜庫搜索鑒定的蛋白共59個,神經(jīng)干細胞移植術前組與正常對照組存在差異的蛋白質有13個,其中有5個蛋白質呈高表達,8個呈低表達。以上13個蛋白質中有7個蛋白質在神經(jīng)干細胞移植術后組與正常對照組表達無差異;假手術術前組表達與神經(jīng)干細

5、胞移植術前組無明顯差異,假手術組術前術后無明顯差異。
　　結論:蛋白質在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)生、轉化過程中起到非常重要的作用,通過蛋白質組學的方法可以有效分析CSF中各種蛋白質的變化情況,為了解神經(jīng)系統(tǒng)生理病理變化提供了一個非常重要的工具,可以發(fā)現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)微觀、定性以及半定量的變化,為疾病的早期診斷以及療效評價提供了基礎。通過研究發(fā)現(xiàn)自體骨髓源神經(jīng)干細胞移植治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的療效比較肯定,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷治療的一個非常有前景的治療方