鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)磷脂酶A-,2-及酶解菜籽油腳條件的優(yōu)化.pdf

1、磷脂是一類含磷酸基團(tuán)的脂類物質(zhì)的總稱,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品、皮革、涂料等領(lǐng)域。由于普通磷脂親水性不夠理想,使磷脂的應(yīng)用受到了很大的限制。為了提高磷脂的親水性,必須對(duì)磷脂進(jìn)行改性。改性方法包括物理改性、化學(xué)改性和酶法改性。由于前兩種方法存在著一些安全性問(wèn)題,已逐漸被淘汰。本實(shí)驗(yàn)采用了酶法改性的方法,利用磷脂酶裂解磷脂分子中的脂肪酸基團(tuán)使之轉(zhuǎn)化成為溶血磷脂,與普通磷脂相比,溶血磷脂在乳化性能方面有明顯改善。
　　 本研究的主

2、要工作是利用李維琳老師構(gòu)建的磷脂酶A2(PLA2)的高產(chǎn)菌株發(fā)酵制備磷脂酶,并用磷脂酶對(duì)油腳磷脂進(jìn)行水解,優(yōu)化出鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)酶和酶水解油腳磷脂的最佳條件,為溶血磷脂的工業(yè)化生產(chǎn)奠定了重要的實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。具體內(nèi)容和結(jié)論如下:
　　 1.利用PLA2高產(chǎn)菌株發(fā)酵制備磷脂酶A2,對(duì)培養(yǎng)基的組成和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,發(fā)酵培養(yǎng)基組成(g/L):黃豆餅粉5.0,麩皮5.0,NaNO35.0,CaCO31.0。最佳搖瓶發(fā)酵條件為:培養(yǎng)基起始pH

3、7.5,培養(yǎng)溫度30℃,搖床轉(zhuǎn)速180r/min,接種量7％,裝瓶量80mL/250mL,三角瓶,接種后48h酶活力由優(yōu)化前的0.43IU/mL,提高到0.54IU/mL,提高了26％。同時(shí)還在10L發(fā)酵罐中進(jìn)行了初步放大試驗(yàn)。當(dāng)接種量7％,初始 pH7.5,通氣量0.5m3/h,在0-16h之間,轉(zhuǎn)速為300r/min,在16-48h之間,轉(zhuǎn)速為50r/min,30℃發(fā)酵,24h PLA2的活力達(dá)到高峰0.55IU/mL。