米根霉發(fā)酵玉米淀粉制備L-乳酸研究.pdf

1、本文以資源豐富的玉米淀粉為原料，以米根霉為菌種，進(jìn)行液體發(fā)酵研究獲得高品質(zhì)L-乳酸的最適發(fā)酵條件。研究了碳源濃度、氮源種類及其濃度、裝液量、溫度和pH等因素對(duì)發(fā)酵過(guò)程菌體生長(zhǎng)及產(chǎn)酸的影響，確定了發(fā)酵的最適碳源、氮源、裝液量、溫度及pH等參數(shù)，同時(shí)利用固定化技術(shù)，采用搖瓶發(fā)酵試驗(yàn)確定了最佳固定化載體材料——絲瓜布，研究了載體的邊長(zhǎng)大小以及用量等方面對(duì)固定化發(fā)酵產(chǎn)酸的影響，同時(shí)比較了固定化細(xì)胞與游離細(xì)胞的批次發(fā)酵能力，為L(zhǎng)-乳酸規(guī)模化生產(chǎn)提

2、供依據(jù)，為聚L-乳酸的批量生產(chǎn)提供可靠的原料來(lái)源。 本次用米根霉As3.3462，經(jīng)過(guò)研究的主要結(jié)論如下： 1、種子培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為（g/L）：葡萄糖60；KH2PO4 0.3，MgSO4 .7H2O 0.25，ZnSO4 .7H2O 0.08，尿素 2。最佳培養(yǎng)條件為：250mL的三角瓶中裝入50mL種子培養(yǎng)基，接種量10％，一次性添加CaCO3 10g/L用于調(diào)節(jié)pH值，置于30℃，轉(zhuǎn)速180 r/min震蕩培養(yǎng)箱

3、，培養(yǎng)20h。 2、搖瓶發(fā)酵最佳培養(yǎng)基（g/L）：玉米淀粉120.0，KH2PO4 0.3，MgSO4.7H2O 0.25，ZnSO4.7H2O 0.08，尿素2.0。最適搖瓶發(fā)酵條件：500mL三角瓶中轉(zhuǎn)入100mL的發(fā)酵培養(yǎng)基，接種量10％，置于30℃，轉(zhuǎn)速180r/min震蕩培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)72h。發(fā)酵12h后一次性加入CaCO3 60.0g/L。在該最適發(fā)酵條件下，該米根霉菌株的搖瓶發(fā)酵L-乳酸積累量86.80g/L，對(duì)原

4、淀粉的轉(zhuǎn)化率65.17％，最高生物量8.8g/L。 3、利用米根霉固定化發(fā)酵玉米淀粉制備L-乳酸，試驗(yàn)利用絲瓜布作為固定化載體，發(fā)酵的適宜條件為：載體邊長(zhǎng)在8～10mm，載體用量選擇15mL/50mL培養(yǎng)基較為適宜。固定化發(fā)酵時(shí)間比游離發(fā)酵時(shí)間縮短12h，即固定化發(fā)酵產(chǎn)率（1.37g乳酸/L*h）相對(duì)游離發(fā)酵的產(chǎn)率（1.15g乳酸/L*h）有所提高。而且固定化發(fā)酵有較強(qiáng)的批次重復(fù)發(fā)酵能力，可連續(xù)發(fā)酵六批次以上。而游離細(xì)胞在發(fā)酵第