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文檔簡介
1、研究背景和目的:
近年來開發(fā)的抗腫瘤藥物大多的化學(xué)結(jié)構(gòu)都很復(fù)雜,空間結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性導(dǎo)致他們的水溶性較差,生物相容性也比較差,這些缺點大大降低了抗腫瘤藥物在生物體內(nèi)的療效,甚至由于藥物非特異的聚集在生物體的某些組織和器官,會對生物體產(chǎn)生一定的毒副作用。
光動力療法(Photodynamic therapy,PDT)是一種光敏劑在光照下產(chǎn)生活性氧(ROS)或者其他因子從而殺死癌細(xì)胞的方法。通過服用或注入光敏藥物,光敏劑會在
2、腫瘤組織中優(yōu)先分布和保留,并在光照下引起腫瘤細(xì)胞凋亡,而不引起正常組織的損傷。由于其良好的藥物性質(zhì),該方法在腫瘤治療中非常具有吸引力。
大多數(shù)光敏劑是基于四吡咯結(jié)構(gòu)的卟啉,氯,以及相關(guān)的分子。最近幾年,富勒烯及其衍生物被發(fā)現(xiàn)是非常有前途的光敏劑,因為富勒烯衍生物被照射時會產(chǎn)生的活性氧,經(jīng)過光處理后對腫瘤有高效的殺傷作用。
目前研究最廣泛的富勒烯是由60個碳原予通過12個五元環(huán)和20個六元環(huán)神奇的組成的足球狀空心對稱分
3、子,分子結(jié)構(gòu)為球形32面體。生物體內(nèi)如單獨使用富勒烯,會因為富勒烯球本身具有結(jié)構(gòu)的特點,不容易在生物體體內(nèi)發(fā)揮作用。將無毒且具有一定藥物活性的基團(tuán)引入到富勒烯球上,既可以改善富勒烯的水溶性,又可以提高富勒烯衍生物的生物相容性,同時降低富勒烯的生物毒性?;谝陨媳尘?,本課題研究了自主合成的具有光敏性的新型富勒烯衍生物的對SGC-7901細(xì)胞的光敏性效應(yīng)機制,希望為光敏性富勒烯衍生物應(yīng)用于人胃癌SGC-7901細(xì)胞的治療提供實驗依據(jù)。
4、> 材料與方法:
1.利用MTT法檢測四種自主合成的富勒烯衍生物作用于人胃癌SGC-7901細(xì)胞后,細(xì)胞的增殖活性。
2.鄰苯三酚自氧化體系和甲基紫-Fenton體系檢測富勒烯衍生物對超氧陰離子自由基和羥基自由基的影響。
3.流式細(xì)胞術(shù)分別檢測不同濃度富勒烯衍生物樣品B1處理后,光照組和非光照組的SGC-7901細(xì)胞的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡以及線粒體膜電位變化。
4.蛋白免疫印跡法檢測富勒烯衍生物B
5、1不同濃度下,光照與非光照處理后SGC-7901細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:
1.新合成的富勒烯衍生物樣品B1相比樣品A1, A2及B2對SGC-7901細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用,且樣品B1作用于SGC-7901細(xì)胞后,相同濃度下光照與非光照組相比抑制作用更顯著,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
2.光照后樣品B1的羥基自由基產(chǎn)生能力顯著增強。
3.樣品B1對SGC-7901細(xì)胞的
6、細(xì)胞周期影響具有濃度依賴性,隨著藥物濃度的升高,主要作用于細(xì)胞的G2/M期,且相同藥物濃度處理下光照組比非光照組對G2/M期的作用更明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
4.樣品B1通過降低SGC-7901細(xì)胞的線粒體的膜電位,促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。
5.樣品B1能夠減弱SGC-7901細(xì)胞中Bcl-2蛋白的表達(dá),樣品B1濃度越高,細(xì)胞中Bcl-2的表達(dá)量越低,且相同濃度下光照后SGC-7901細(xì)胞Bcl-2表達(dá)減弱
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