殼寡糖的酶法制備及其抗菌性的研究.pdf

1、采用實驗室篩選菌種Penicillium SP.ZD-Z1進行發(fā)酵65-70h以后，發(fā)酵液經過抽濾、超濾、乙醇沉淀和冷凍離心濃縮等步驟，最后經過陽離子交換分離得到殼聚糖酶內切酶ChA和外切酶ChB。經過內切酶ChA與外切酶ChB降解的2％(W/V)殼聚糖溶液，用截留分子量為2kDa的膜進行超濾，得到分子量小于2kDa的濾過液，經真空濃縮、噴霧干燥，得到產品S1和S2。 直接通過發(fā)酵的方法，經過65h后，放罐，分別通過截留分子量為

2、10kDa、5kDa和2kDa的膜超濾，經真空濃縮、噴霧干燥，得到產品S3(0-2kDa)、S4(2k-5kDa)和S5(5k-10kDa)。 實驗中通過乙酰丙酮的方法測定了不同分子量的殼寡糖產品S1(內切酶降解)、S2(外切酶降解)和發(fā)酵法直接制備的S3、S4和S5，這五種殼寡糖的相對分子質量分別為3726、475、2133、5170和8952。 實驗中測定了五種不同分子量的殼寡糖產品S1、S2、S3、S4和S5對大腸

3、桿菌性和枯草芽孢桿菌的抗菌性能試驗，實驗結果表明：隨著殼寡糖分子量的增大抑制大腸桿菌的能力逐漸減弱，隨著分子量的增大抑制枯草芽孢桿菌的能力逐漸增強，且隨著濃度的增加抗菌作用增加。在濃度為0.5％時的樣品S4和S5，對枯草芽孢桿菌的抑制率就達到了90％以上，S3在此濃度的抑制率才只有85.5％。而殼寡糖S2對枯草芽孢桿菌根本沒有抑菌的效果，而且隨著濃度的增大，與空白相比菌落的數(shù)目更多些，在殼寡糖濃度為0.25％、0.5％和1％的平板中的菌