酶法制備馬鈴薯淀粉磷酸寡糖及相關酶系的研究.pdf

1、磷酸寡糖（Phosphoryl Oligosaccharides，POs）是指麥芽低聚糖中的某些葡萄糖殘基與磷酸根共價連接的一種新型的功能性低聚糖。馬鈴薯磷酸寡糖是從馬鈴薯淀粉酶解液中得到的含有磷酸基團的麥芽低聚糖。除了具有一般低聚糖的生理功能外，還具有促進鈣，鐵等礦物質吸收的功能。
　　 本文闡述了以馬鈴薯淀粉水解液為原料，采用酶法制備磷酸寡糖。并且比較了馬鈴薯淀粉水解法，馬鈴薯淀粉磷酸酯化水解法，玉米淀粉制備麥芽低聚糖酯化法

2、等幾種不同的制備方法。其中玉米淀粉制備麥芽低聚糖酯化法所得到的磷酸寡糖得率為最大（3.989％）。
　　 本文以纖維素陰離子交換樹脂為柱材料，分離出了一組磷酸寡糖，對其組分進行了研究，發(fā)現(xiàn)脫去磷酸根的POs主要是由麥芽三糖，麥芽四糖，麥芽五糖，麥芽六糖等組成。計算出PO1與PO2部分的磷酸根聚合度分別為3.98和5.78。
　　 除此之外，由于水解馬鈴薯淀粉存在所用的耐高溫α-淀粉酶、真菌α-淀粉酶、普魯蘭酶所需的最適p

3、H、溫度差異大，以及上述三種酶需由三種菌株產(chǎn)生、生產(chǎn)成本較高等問題，我們對一組能同時產(chǎn)生酸性α-淀粉酶、糖化酶、異淀粉酶的黑曲霉菌種進行了單因子試驗。篩選到一株產(chǎn)酸性α-淀粉酶較佳的菌種P2301。并對其液態(tài)、固態(tài)發(fā)酵進行了條件研究，確定最佳產(chǎn)酶因素，其中液態(tài)發(fā)酵的耐酸性α-淀粉酶最高酶活為38.29 IU/mL，糖化酶活為57.58 IU/mL，異淀粉酶活為47.6 U/mL。固態(tài)發(fā)酵的耐酸性α-淀粉酶最高酶活為779.9 U/g干曲

4、，糖化酶活為1215.8 IU/g干曲，異淀粉酶活為357U/g干曲。
　　 采用上述黑曲霉產(chǎn)生的復合酶系發(fā)酵所得酶液，進行馬鈴薯淀粉水解，水解不存在pH、溫度調節(jié)和多個產(chǎn)酶菌種等問題，所需反應時間相對傳統(tǒng)制備磷酸寡糖工藝減少。在加入實驗室自制酶液50 mL/g時，作用5h，液化較完全。
　　 磷酸寡糖是一組含有磷酸根的麥芽低聚糖，其分子量介于600-1500之間，因此使用納濾設備可以進行分離。實驗室用制備的馬鈴薯淀粉酶