代謝農(nóng)藥活性物質(zhì)稀有放線菌的篩選.pdf

1、本項(xiàng)研究以篩選代謝農(nóng)藥活性稀有放線菌為目標(biāo)，對從安徽、浙江、山東、陜西、四川等5省11地采集的31份土壤樣品和11份海沙樣品中的稀有放線菌進(jìn)行了選擇性分離，并測定了所分離放線菌的農(nóng)藥活性，在此基礎(chǔ)上對部分活性菌株進(jìn)行了初步分類鑒定。本文主要研究成果如下： (1)從42份樣品中共分離得到578株放線菌，分別隸屬鏈霉菌屬(Streptomyces)、小單孢菌屬(Micromonospora)、馬杜拉菌屬(Actinomadura)、

2、諾卡氏菌屬(Nocardia)、鏈孢囊菌屬(Streptosporangium)、小雙孢菌屬(Microbiospora)、糖多孢菌屬(Saccharopolyspora)和游動(dòng)放線菌屬(Actinoplane)等8屬。研究發(fā)現(xiàn)，以改進(jìn)HVA培養(yǎng)基為分離培養(yǎng)基，將土壤樣品稀釋100倍，添加20mg·L<'-1>重鉻酸鉀+20mg·L<'-1>萘啶酮酸+10mg·L<'-1>卡那霉素作為抑制劑對稀有放線菌分離效果最好。 (2)測定

3、了578株放線菌的發(fā)酵液對小麥根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)、煙草赤星病菌(Alternaria alternate)3種病原真菌和枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)3種細(xì)菌的抗菌活性，發(fā)現(xiàn)其中8株表現(xiàn)良好的的抑菌活性。其編號分別為N

4、WAFU032，NWAFU075，NWAFU223，NWAFU227，NWAFU238，NWAFU309，NWAFU313，NWAFU526。其中，菌株NWAFU032，NWAFU075，NWAFU223，NWAFU227，NWAFU238等5株對供試病原真菌和細(xì)菌均表現(xiàn)出良好的活性，NWAFU309，NWAFU313僅對供試細(xì)菌表現(xiàn)良好的活性，NWAFU526只對供試真菌表現(xiàn)良好的活性。離體條件下NWAFU032，NWAFU075，N

5、WAFU223，NWAFU227，NWAFU238和NWAFU526等6株放線菌菌株發(fā)酵液對小麥根腐病菌、玉米大斑病菌、煙草赤星病菌的菌絲生長和孢子萌發(fā)均有強(qiáng)烈的抑制作用，其中NWAF223和NWAF238菌株發(fā)酵液對病原真菌菌絲生長的抑制中濃(EC<,50>)值均小于10mL·L<'-1>；NWAF526菌株發(fā)酵液對小麥根腐病菌、玉米大斑病菌、煙草赤星病菌孢子萌發(fā)的EC<,50>分別為14.01 mL·L<'-1>、14.56 mL·

6、L<'-1>、17.36 mL·L<'-1>。NWAFU032，NWAFU075，NWAFU223，NWAFU227，NWAFU238,NWAFU309和NWAFU313等7株放線菌發(fā)酵液對枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌有顯著抑制作用，其中NWAFU223菌株發(fā)酵液抑制作用最強(qiáng)，抑菌圈直徑達(dá)30mm以上。盆栽實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，6株具抗植物病原真菌活性的放線菌發(fā)酵液防治小麥白粉病的保護(hù)效果為71.29％～82.35％，治療效果為58.

7、53％～70.80％。未發(fā)現(xiàn)具有明顯殺蟲或除草活性的菌株。 (3)采用傳統(tǒng)分類和分子分類相結(jié)合的方法研究了NWAFU227、NWAFU238、NWAFU309和NWAFU313四株菌的分類地位?；?6SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹表明，NWAFU227，NWAFU238和NWAFU309屬于鏈霉菌屬，NWAFU313隸屬小單孢菌屬，16SrDNA序列相似度均為98％。結(jié)合培養(yǎng)特征和生理生化特性實(shí)驗(yàn)分析，菌株NWAFU238、NWA