啤酒廢酵母中β-1,3-D-葡聚糖的制備及性質(zhì)研究.pdf

1、啤酒酵母細(xì)胞壁中含有的30％～60％β-葡聚糖(干重)，是最好的活性免疫多糖之一。我國(guó)年產(chǎn)啤酒廢酵母超過6萬(wàn)噸(干重)，絕大多數(shù)直接排棄或簡(jiǎn)單加工成普通飼料廉價(jià)售出，附加值低，如果能將啤酒廢酵母中的β-葡聚糖提取并加以應(yīng)用，將會(huì)產(chǎn)生巨大的社會(huì)效益與經(jīng)濟(jì)效益。本文以啤酒廢酵母為原材料，采用自溶-熱水浸提-超聲破壁-酶堿法提取β-1，3-D-葡聚糖，對(duì)影響酵母自溶、熱水浸提和超聲破壁的一系列關(guān)鍵性因素進(jìn)行了探討，同時(shí)對(duì)β-1，3-D-葡聚糖

2、產(chǎn)品的純化方法和性質(zhì)特征進(jìn)行了深入的研究，主要研究結(jié)果如下：
　　 1.以啤酒廢酵母為原材料，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)啤酒廢酵母自溶進(jìn)行了研究，得到了啤酒廢酵母自溶最佳工藝條件：自溶溫度50℃，自溶pH5.0,NaCl添加量為3％(w/w)，自溶時(shí)間24h。
　　 2.采用單因素實(shí)驗(yàn)和U5(52)均勻表設(shè)計(jì)方法對(duì)啤酒廢酵母熱水浸提條件進(jìn)行了研究，獲得熱水浸提最佳條件為浸提溫度115℃，浸提時(shí)間4h。
　　 3.

3、采用單因素試驗(yàn)和Box-Behnken正交析因素試驗(yàn)優(yōu)化超聲破壁工藝，獲得影響啤酒廢酵母超聲破壁的主要因素是超聲功率X2，其次是超聲時(shí)間X3和超聲溫度X4；優(yōu)化得到超聲破壁的理想條件為酵母質(zhì)量濃度200g/L，超聲功率800W，超聲時(shí)間80min，超聲溫度50℃。
　　 4.比較了堿法、酸堿法、酶法和酶堿法四種去除蛋白質(zhì)的方法，其中酶堿法處理成品蛋白質(zhì)含量最低，純度最高達(dá)到90.63％，得率達(dá)到10.31％，相比馬森等人用超聲酶

4、堿法制得的產(chǎn)品得率10.21％，純度88.14％，產(chǎn)品得率和純度進(jìn)一步提高。
　　 5.通過溶解性分析、顏色反應(yīng)檢測(cè)、薄層層析和紅外光譜分析，本試驗(yàn)制得的產(chǎn)品為純度較高的具有生理活性的堿不溶性酵母β-1，3-D-葡聚糖，且產(chǎn)品中不含甘露聚糖。
　　 6.得出了一條合理的提取高純度酵母β-1，3-D-葡聚糖的制備工藝：啤酒廢酵母加蒸餾水離心(4000r/min，10min)洗滌，至上清液澄清且無(wú)明顯啤酒味；沉淀加蒸餾水配成

5、10％(w/w)的懸浮液，按3％(w/w)的濃度添加NaCl，用食品級(jí)鹽酸調(diào)pH5.0,50℃保溫自溶24h后，115℃高壓下，熱水浸提4h，離心，收集沉淀，然后配成酵母質(zhì)量濃度為200g/L的酵母懸浮液，控制超聲功率800w，超聲溫度50℃，超聲80min超聲破壁處理，離心，沉淀按料液比(w/v=1/3，w：廢酵母濕重，以g計(jì)，v：蒸餾水體積mL，下同)加蒸餾水，按200u/g底物的添加量添加木瓜蛋白酶，60℃，pH6.0,酶解8h，