啤酒酵母中RNA、β-（1，3）-D-葡聚糖和蛋白質(zhì)的提取及應用研究.pdf

1、啤酒酵母營養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)48.8％，賴氨酸含量較高；β-(1，3)-D-葡聚糖29％，是生物多糖中最具抗癌活性的多糖物質(zhì)；RNA 2.67～10.0％，在醫(yī)藥、食品化妝品以及農(nóng)業(yè)等行業(yè)中具有重要的用途。我國是世界第一大啤酒生產(chǎn)國，年產(chǎn)干燥廢啤酒酵母10萬多噸。利用啤酒廢酵母生產(chǎn)有用物質(zhì)，既能減少環(huán)境污染，又能實現(xiàn)廢物的增值增效，延長拓寬產(chǎn)業(yè)鏈條。本文以啤酒酵母為原料，研究了RNA、β-(1，3)-D-葡聚糖和蛋白質(zhì)的分離、提取方法，主要

2、研究結(jié)果如下： 1.以啤酒酵母粉為試驗原料，稀堿法提取RNA，最佳提取條件為：NaOH濃度0.4％、溫度100℃、時間1h、堿料比15mL：1g、醇料比10mL：1g；RNA提取率為5.25％，RNA含量為83.8％。 2.對比不同的β-(1，3)-D-葡聚糖提取方法，確定堿-酶法提取啤酒酵母粉中的β-(1，3)-D-葡聚糖。最佳提取條件為：NaOH濃度3％、溫度80℃、時間2h、堿料比15mL：1g、堿性蛋白酶600U

3、/g；β-(1，3)-D-葡聚糖提取率13.8％、含量85.2％，粘均分子量為192KD；薄板層析顯示，提取物水解后只含有葡萄糖；紅外光譜分析證明，提取物是純度較高的β-(1，3)-D-葡聚糖。 3.分步法提取蛋白質(zhì)，第一步，RNA提取后離心上清液中pH4.2～4.5沉淀蛋白質(zhì)，第二步，β-(1，3)-D-葡聚糖提取后離心上清液中pH3.8～4.1沉淀蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)提取率13.2％、粗蛋白含量79.1％。氨基酸全分析顯示，八種必

4、需氨基酸的含量及組成與FAO標準非常一致。 4.通過單因素和正交試驗，影響β-(1，3)-D-葡聚糖水解的各因素順序依次為：預水解硫酸濃度>水解溫度>水解硫酸濃度>水解時間。水解參數(shù)為：預水解硫酸濃度12 mol/L、水解硫酸濃度2 mol/L、水解溫度100℃、水解時間24h。 5.試驗結(jié)果表明：經(jīng)口給予小鼠酵母β-(1，3)-D-葡聚糖30天后，能提高小鼠足跖腫脹度、抗體生成細胞數(shù)，對巨噬細胞吞噬指數(shù)無影響。提示β-