普那霉素發(fā)酵工藝研究.pdf

1、普那霉素(pristinamycin)屬鏈陽(yáng)性菌素類抗生素,系始旋鏈霉菌(.Streptomycespristinaespiralis)產(chǎn)生,由普那霉素Ⅰ和普那霉素Ⅱ組成.普那霉素Ⅰ為環(huán)六肽內(nèi)酯,普那霉素Ⅱ?yàn)槎嗖伙柡铜h(huán)內(nèi)酯.普那霉素經(jīng)化學(xué)修飾得到的水溶性衍生物RP59500,是一種注射用的半合成鏈陽(yáng)性菌素,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性菌具有很強(qiáng)的抑菌活性. 本文對(duì)普那霉素發(fā)酵工藝進(jìn)行了各種優(yōu)化,提高普那霉素產(chǎn)量:

2、 (1)對(duì)搖瓶發(fā)酵工藝進(jìn)行研究.通過(guò)單因素法研究了不同接種齡,不同接種量和不同溫度對(duì)普那霉素發(fā)酵的影響,最終確定普那霉素?fù)u瓶發(fā)酵的最佳條件,接種齡為36h,接種量為6﹪,培養(yǎng)溫度為28℃;研究了發(fā)酵培養(yǎng)基中不同初始葡萄糖糖濃度對(duì)普那霉素發(fā)酵的影響,確定發(fā)酵培養(yǎng)基初糖濃度為10g/L;考察了不同金屬離子對(duì)搖瓶發(fā)酵的影響,結(jié)果表明添加了50mg/L Cu<'2+>的發(fā)酵培養(yǎng)基可以使普那霉素產(chǎn)量提高11﹪;添加了50mg/L的MO<'6+>的

3、發(fā)酵培養(yǎng)基可以使普那霉素產(chǎn)量提高14﹪;而當(dāng)發(fā)酵培養(yǎng)基中添加了25mg/L Fe<'2+>時(shí),普那霉素產(chǎn)量提高了43﹪. (2)搖瓶發(fā)酵中分別加入1,2,3顆玻璃珠后,對(duì)普那霉素發(fā)酵的影響并不大;2.5L,發(fā)酵罐分批發(fā)酵的普那霉素產(chǎn)量為224.7mg/L,比該菌種的搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量提高了71.4﹪.利用Origin 7.0軟件擬合得到以下方程: (3)搖瓶發(fā)酵36h時(shí)加入0.15﹪的正丙醇,發(fā)酵結(jié)束時(shí)普那霉素產(chǎn)量達(dá)197.8

4、mg/L,與不加前體時(shí)的產(chǎn)量相比提高了50.8﹪.2.5L發(fā)酵罐24h補(bǔ)入0.15﹪的正丙醇,普那霉素產(chǎn)量318.8mg/L,與不加前體時(shí)相比提高了41.9﹪.添加了前體的發(fā)酵,pH明顯低于未添加前體的發(fā)酵,糖氮量的消耗快于未添加前體的發(fā)酵過(guò)程. (4)在普那霉素?fù)u瓶發(fā)酵過(guò)程中,在發(fā)酵培養(yǎng)24h,30h時(shí)補(bǔ)入混合氮源(黃豆餅粉2﹪,魚(yú)粉0.8﹪,硫酸銨0.2﹪和硝酸鈉0.12﹪),繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)至40h后,維持葡萄糖濃度為6g/L