茶多酚和茶多糖提純研究.pdf

1、1.綜述了茶多酚、兒茶素單體以及茶多糖的結(jié)構(gòu)性質(zhì)、提取分離、分析檢測(cè)和應(yīng)用現(xiàn)狀,并對(duì)各種提取分離方法和分析檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了比較。
　　 2.以日照綠茶為實(shí)驗(yàn)原料,采用正交實(shí)驗(yàn)及單因素平行實(shí)驗(yàn)的方案,分析了料液比、浸提時(shí)間和浸提溫度對(duì)茶多酚和茶多糖萃取效果的影響,同時(shí)研究了茶葉粒度、攪拌等對(duì)萃取效果的影響。優(yōu)化得出了如下的提取方案:在攪拌的條件下,用茶葉質(zhì)量20倍的蒸餾水在70℃分2次浸提,每次浸提45min,在此條件下,茶

2、多酚的水提含率為15.76％,茶多糖的水提含率為2.78％。
　　 3.為了將提取的茶多酚和茶多糖分離出來(lái),采用平行實(shí)驗(yàn)的方案,以提取實(shí)驗(yàn)得到的浸提液為原料,研究了乙酸乙酯的萃取次數(shù)對(duì)茶多酚實(shí)際得率的影響,以及9596的乙醇體積倍數(shù)對(duì)茶多糖實(shí)際得率的影響。優(yōu)化得出了如下的分離方案:將浸提液濃縮至固含量為5％,再用等量的乙酸乙酯萃取2次,分離茶多糖的乙醇用量為水相體積的3倍。在此條件下,茶多酚的實(shí)際產(chǎn)率為21.53％,茶多糖的實(shí)際

3、產(chǎn)率為3.01％。
　　 4.采用Sevag法、三氯乙酸法和鞣酸法,對(duì)日照綠茶粗多糖進(jìn)行脫蛋白研究,結(jié)果表明:Sevag法茶多糖含量較高,但茶多糖保留率較低,并且需重復(fù)多次,效率低,有毒性溶劑殘留;鞣酸法茶多糖保留率較高,但脫蛋白率和茶多糖含量較低;三氯乙酸法在蛋白質(zhì)脫除率、茶多糖保留率和茶多糖含量三個(gè)方面的綜合指標(biāo)較理想,當(dāng)pH值為4.0時(shí),蛋白質(zhì)脫除率達(dá)到68.4％,茶多糖保留率為66.8％,茶多糖的含量為72.5％。

4、>　　 5.采用雙氧水法和AB-8樹(shù)脂法,對(duì)日照綠茶粗多糖進(jìn)行脫色研究,得到的最佳工藝條件為:
　　 1)雙氧水法:雙氧水添加量為多糖溶液體積的60％,調(diào)節(jié)pH為9.0,在50℃水浴下保溫3h。此條件下,脫色率達(dá)65.1％,茶多糖保留率為76.4％。
　　 2)AB-8樹(shù)脂法:用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH為4.0,恒溫振蕩1h。此條件下,脫色率為79.2％,茶多糖保留率為58.5％。
　　 6.為了得到高純度的EGCG單體

5、,用AB-8樹(shù)脂和LH-20凝膠樹(shù)脂對(duì)茶多酚粗品進(jìn)行初步純化和二次純化研究,結(jié)果表明:
　　 1)蒸餾水作溶劑時(shí)AB-8樹(shù)脂對(duì)兒茶素單體的吸附性能最好,此時(shí)樹(shù)脂對(duì)TP總量的吸附達(dá)63.08mg/g,對(duì)EGCG單體的吸附量為33.87 mg/g,對(duì)ECG單體的吸附量為7.69 mg/g。隨著乙醇濃度的增加,AB-8樹(shù)脂對(duì)茶多酚總量和各兒茶素單體的吸附能力降低,無(wú)水乙醇的解吸性能最好。用無(wú)水乙醇對(duì)AB-8樹(shù)脂柱進(jìn)行動(dòng)態(tài)洗脫,流速為1

6、.0-1.5 mL/min,收集富含EGCG和ECG的流分,測(cè)得EGCG的含量為78.32％。
　　 2)以濃度為50％和75％的乙醇溶液解吸LH-20凝膠樹(shù)脂,結(jié)果顯示兩者對(duì)EGCG和ECG兩種單體的解吸率相差都比較大,差值約為23％。但50％的乙醇溶液的解吸率要低于75％的乙醇溶液的解吸率,且流速慢,不易操作,所以選用75％乙醇溶液做洗脫劑。收集到富含EGCG和ECG的流分濃縮后上LH-20凝膠柱,以75％的乙醇溶液作為洗脫