紅曲多糖的發(fā)酵生產(chǎn)及提純.pdf

1、紅曲是一種“藥食同源”的典型代表真菌，紅曲培養(yǎng)物具有多種生理活性物質(zhì)，近來(lái)新發(fā)現(xiàn)紅曲多糖是一種具有免疫調(diào)節(jié)、保肝解毒功效的活性物質(zhì)，本文對(duì)紅曲菌液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)多糖的工藝條件、紅曲多糖提取純化和結(jié)構(gòu)的初步鑒定進(jìn)行研究。 通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)室8株紅曲菌進(jìn)行篩選，得到一株多糖含量較高的紅曲菌ZKOA；優(yōu)化后的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基為：蔗糖40g/L，酵母粉4.5g/L，KH2PO4·3H2O3.5g/L，MgSO40.4g/L，植物油2mL/L；優(yōu)化發(fā)

2、酵工藝后得到的發(fā)酵條件是：接種量8％，種齡30h，發(fā)酵液起始pH5.0，發(fā)酵時(shí)間90h。在此條件下，紅曲多糖的產(chǎn)率最高可達(dá)7.6g/L。在攪拌速率為170r/min，通風(fēng)量為22NL/min的條件下，20L發(fā)酵罐中紅曲粗多糖含量可達(dá)到7.34g/L；在此條件下，發(fā)酵液中紅曲52 多糖的含量(W)與菌體量(X)的關(guān)系為W=0.0007X6.1898。 實(shí)驗(yàn)研究了紅曲多糖的脫蛋白工藝，工藝路線為：發(fā)酵液在60℃下濃縮至原體積

3、的1/5→乙醇沉淀得粗多糖→復(fù)溶去不容物→上清液用等電點(diǎn)法脫蛋白，去沉淀→0.2％的木瓜蛋白酶45℃酶解3h→Sevag法脫蛋白→得到無(wú)游離雜蛋白的多糖溶液。 脫蛋白后多糖溶液中加入4倍體積的工業(yè)酒精，沉淀多糖，沉淀物干燥后為白色，色素和其他小分子物質(zhì)基本得到脫除。 用DEAE—纖維素層析純化多糖提物，依次用純水、0.2mol/LNaCl、0.4mol/L，NaCl、0.6mol/LNaCl洗脫，可以得到三個(gè)不同等級(jí)分子