能源甘蔗汁高溫酒精發(fā)酵酵母菌種的選育.pdf

1、本文以甘蔗糖蜜酒精生產(chǎn)菌種釀酒酵母(Saccharomyces cereviviae)Y01和耐高溫的馬克斯克魯維酵母(Kluyveromys marxianus)Y05作為出發(fā)菌株，應用原生質(zhì)體融合技術(shù)進行屬間雜交，選育適合于能源甘蔗汁高溫發(fā)酵高產(chǎn)酒精的酵母菌種。主要研究內(nèi)容如下： 1.全面考察了融合親株的生理特性及酒精發(fā)酵特性。釀酒酵母Y01和馬克斯克魯維酵母Y05都能發(fā)酵甘蔗汁產(chǎn)生酒精。Y01最適生長溫度為30℃，最適發(fā)酵

2、溫度為32℃，能耐受14％(v/v)的酒精和35°Bx的蔗糖，但對溫度較為敏感，以18°Bx的能源甘蔗汁為發(fā)酵培養(yǎng)基，32℃發(fā)酵72h，發(fā)酵醪中酒精為10.63％(v/v)，40℃發(fā)酵72h，發(fā)酵醪中酒精降為7.90％(v/v)。Y05最適生長溫度為37℃，最適發(fā)酵溫度為34℃，溫度升高對其酒精發(fā)酵影響不大。 2.確定了釀酒酵母Y01和馬克斯克魯維酵母Y05原生質(zhì)體制備與再生的最佳條件。菌齡9h的釀酒酵母Y01，在30℃下用1.

3、5％N蝸牛酶+0.5％的纖維素酶處理70min，其原生質(zhì)體形成率為90.8％～95.3％，再生率為15.1％～21.3％。菌齡8h的馬克斯克魯維酵母Y05，在30℃下用1.0％的蝸牛酶+0.5％的纖維素酶處理50min，其原生質(zhì)體形成率為94.8％～99.7％，再生率為32.5％～39.8％。2株菌酶解液穩(wěn)滲劑都采用4％NaCl，稀釋和配制再生培養(yǎng)基采用15％蔗糖。 3.篩選到1株耐高溫高產(chǎn)酒精的融合子(融70)，融70在16°