殼聚糖納米粒子抑菌效果及免疫效果評價.pdf

1、殼聚糖(chitosan)是一種天然陽離子聚合物,來源豐富,成本低,具有良好的生物相容性、生物可降解性、無毒性,同時還具有抗菌、殺菌、抗腫瘤、提高免疫能力、促進組織修復(fù)及止血的作用,在生物醫(yī)學領(lǐng)域具有極廣闊的前景。將殼聚糖制備成緩釋制劑可減少給藥次數(shù),而且可以提高藥物安全性、有效性及可靠性。理想的佐劑需要具備以下特點：無毒性、無免疫原性、較好的生物相容性、可生物降解、能有效誘導(dǎo)或增強細胞免疫及長效性,因此,殼聚糖具有開發(fā)成為新型免疫佐劑

2、的潛在價值。
　　 本研究以殼聚糖為材料,采用離子交聯(lián)法,以三聚磷酸鈉(TPP)為交聯(lián)劑,制備殼聚糖納米粒子,并且對其抑菌性能進行研究。粒徑分析和原子力學顯微鏡(AFM)分析結(jié)果表明,殼聚糖納米粒子呈顆粒狀,粒度均一,分散性良好,四種不同濃度的TPP制備的殼聚糖納米粒子粒徑分別為14.128±0.026nm、29.132±0.032nm、44.333±0.104nm和70.284±0.063nm。抑菌性能研究結(jié)果表明,殼聚糖納米

3、粒子對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的生長均有抑制作用,抑菌效果優(yōu)于殼聚糖本身,且殼聚糖納米粒子對金黃色葡萄球菌的抑菌效果略優(yōu)于大腸桿菌。
　　 以牛血清白蛋白(BSA)為蛋白類藥物模型,進行殼聚糖納米粒子對BSA的吸附性能研究,討論了吸附條件對吸附率的影響,隨后評價了載BSA殼聚糖納米粒子的體外釋放行為,結(jié)果表明,優(yōu)化吸附蛋白類藥物的條件后的吸附率為21.82±1.43％,載BSA殼聚糖納米粒子72小時累積釋放量為32.98±2.3

4、5％,緩釋效果明顯。
　　 在體內(nèi)免疫研究中,殼聚糖納米粒吸附牛冠狀病毒核衣殼蛋白(Bovinecoronavirus N protein,BCV-N)作為模板藥物,吸附率達到73.26±1.32％,然后用載BCV-N蛋白殼聚糖納米粒通過肌肉注射免疫BALB／c小鼠,用間接ELISA方法檢測血清中IgG、IgM和IgA抗體水平及動態(tài)變化。結(jié)果表明,殼聚糖納米粒子的緩釋效果明顯,且本身沒有免疫原性,可顯著提高免疫后小鼠體內(nèi)的IgG