芳香族香料對酪氨酸酶的抑制及生物學(xué)效應(yīng)研究.pdf

1、酪氨酸酶(EC.1.14.18.1)是一種含銅的氧化還原酶,它具有單酚酶活性和二酚酶活性,是生物體合成黑色素的限速酶,廣泛存在于微生物、動植物及人體中。其抑制劑可廣泛應(yīng)用于美白化妝品、果蔬保鮮、殺蟲等方面。
　　 本論文圍繞三大部分進(jìn)行,第一部分是探討蘑菇酪氨酸酶的抑制劑對單酚酶和二酚酶催化反應(yīng)的抑制機(jī)理。研究了芳香族香料對蘑菇酪氨酸單酚酶和二酚酶效應(yīng),研究它們的抑制機(jī)理,并測定它們的抑制類型和抑制常數(shù)。第二部分以小鼠B16黑色

2、素瘤細(xì)胞為研究對象,研究了芳香族香料對細(xì)胞增殖率、體內(nèi)酪氨酸酶活力和對細(xì)胞黑色素生成的影響。第三部分是以大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌、串珠鐮刀桿菌、茄形鐮刀菌、尖孢鐮刀菌和炭疽桿菌作為實驗菌種,研究抑制劑的抑菌效應(yīng)。研究結(jié)果和內(nèi)容如下:
　　 (1)研究抑制劑對蘑菇酪氨酸二酚酶的抑制作用時,分別研究了苯丙醛、苯丙醇、肉桂醇、肉桂酸乙酯、芐叉丙酮、芐基丙酮、4-苯基-2-丁醇、覆盆子酮、4-(4-羥基苯基)-3-丁烯酮-

3、2、玫瑰烷和2-甲基-5-苯基-2,4-戊二烯醛對蘑菇酪氨酸二酚酶的抑制作用。研究結(jié)果表明,這十一個化合物對蘑菇酪氨酸二酚酶具有不同程度的抑制作用,并測得它們對二酚酶抑制的IC50值。研究了它們對酪氨酸二酚酶的抑制機(jī)理,研究結(jié)果表明這十一個化合物對酪氨酸酶均為可逆抑制。在研究這十一個化合物對酪氨酸二酚酶抑制類型得到如下結(jié)果:苯丙醛、覆盆子酮和4-(4-羥基苯基)-3-丁烯酮-2的抑制類型為反競爭;苯丙醇、肉桂醇、芐叉丙酮和芐基丙酮的抑制

4、類型為混合Ⅰ型競爭;肉桂酸乙酯、4-苯基-2-丁醇和2-甲基-5-苯基-2,4-戊二烯醛的抑制類型為非競爭;玫瑰烷的抑制類型為競爭型。并測定了這十一個化合物對酪氨酸二酚酶的抑制常數(shù)。
　　 (2)研究抑制劑對蘑菇酪氨酸單酚酶的抑制作用時,分別研究了苯丙醇、肉桂醇、芐叉丙酮、芐基丙酮、4-苯基-2-丁醇、覆盆子酮、4-(4-羥基苯基)-3-丁烯酮-2、玫瑰烷和2-甲基-5-苯基-2,4-戊二烯醛對蘑菇酪氨酸單酚酶的抑制作用。研究結(jié)

5、果表明,這九個化合物對蘑菇酪氨酸單酚酶具有不同程度的抑制作用,并測得它們對單酚酶抑制的IC50值。研究了芐叉丙酮、芐基丙酮、4-苯基-2-丁醇、玫瑰烷和2-甲基-5-苯基-2,4-戊二烯醛對酪氨酸單酚酶抑制類型得到如下結(jié)果:芐叉丙酮、芐基丙酮、4-苯基-2-丁醇、玫瑰烷的抑制類型為混合Ⅰ型競爭;2-甲基-5-苯基-2,4-戊二烯醛的抑制類型為非競爭。并測定了這五個化合物對酪氨酸單酚酶的抑制常數(shù)。
　　 (3)選擇了玫瑰烷和2-甲

6、基-5-苯基-2,4-戊二烯醛作為效應(yīng)物,研究它們對小鼠B16細(xì)胞增殖率、體內(nèi)酪氨酸酶活力和它們對細(xì)胞內(nèi)黑色素生成的影響。研究表明,這兩個化合物在實驗0.02 mM/L濃度下對B16細(xì)胞沒有毒性,玫瑰烷對細(xì)胞體內(nèi)酪氨酸酶的活力和黑色素含量無顯著的影響,2-甲基-5-苯基-2,4-戊二烯醛對細(xì)胞體內(nèi)酪氨酸酶的活力和黑色素生成有一定的抑制作用。
　　 (4)分別研究了如上十一種芳香族香料對大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌、串珠

7、鐮刀菌、茄形鐮刀菌、尖孢鐮刀菌和炭疽桿菌的抑制作用。結(jié)果表明,11種芳香族香料對真菌的抑制作用比對細(xì)菌的抑制作用強(qiáng)。在對三種細(xì)菌的抑制中,只有2-甲基-5-苯基-2,4-戊二烯醛和4-(4-羥基苯基)-3-丁烯酮和4-苯基-3-丁烯酮-2有抑制作用,其它幾個化合物在50 mg/mL的濃度下均對所測三種細(xì)菌沒有抑制作用。在對如上四種真菌的抑菌實驗中,11種芳香族香料都表現(xiàn)出抑菌性,其中4-苯基-3-丁烯酮-2最強(qiáng),4-(4-羥基苯基)-3