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1、江西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文一珠腈水合酶產(chǎn)生菌發(fā)酵過(guò)程的控制及其酶學(xué)性質(zhì)的研究姓名:黃偉波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):生物化工指導(dǎo)教師:王筱蘭201105AbstractThenitrilehydratase(NHase,EC42184)fromMicrobial,whichcatalyzesthehydrationofnitrilestoamidesisanimportantbiologicalcatalystintheindustrialp
2、roductionofacrylamide(AM)IthasmanyadvantagesSuchasmildreactionconditions,hi曲yields,fewerbyproductsWiththegrowingdemandforAM,ChineseandforeignsehloarshaveawidelyresearchinNHaseproducingstrainTheydidmanystudiesinthemicrobi
3、alstrainscreenoptimizationoffermentationconditionsandenzymaticproperties,SOachievesfavourableresultsTheoptimizationconditionsintheshakingflasksWasdeterminedUndertheconditionofinitialpH75,glucoseconcentrationWas209perlite
4、rureaconcentrationWas79perlitersodiumglutamateconcertrationWaslgperliterthepromoterwaslmilliliterperliter(Co腫terminalconcertrationWasO002489perliter),theNHaseenzymeactivityreachedupto96714U/mLTheeffectofcellgrowthpHandgl
5、ucoseconsumptionontheproductionofNHasewasstudiedItWasshownthattheproductionofNHasehadpositivecorrelationwiththecellgrowthinthecultureAglucosefedbatchfermentationforproductionofhigllactivityNHaseina2LfermentorWasestablish
6、edIntheglucosefedbatchfermentationthatmaintaindthepHat65andtheglucoseconcentrationin159/L~69/LtheNnaseactivitywasincreasedtO28143U/mLwhichWas87foldcomparedtothatinthebatchfermentationmcellultrasonicationconditionWasoptim
7、izedaimingatthehi曲specificacttivityofNHaseinthecellfreeextractUndertheconditionsof160W5secofsonicationfollowedby5seccooling,thetotaltimeWas30min,theNHasespecificactivityreacheduptomaximumTheenzymefromcellfreeextractWaspr
8、eliminarypurifiedbyammoniumsulfatefractionationthepurificationWas125foldsandtheactivityyieldWas481%TheoptimumtemperatureandpHofthepurifiedenzymeWas30℃and70Keywords:NitrileHydratase;Nocardiasp;Fed—BatchFermentation;Purifi
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