豬骨蛋白的酶解及其產(chǎn)物的功能特性研究.pdf

1、本文以豬骨為原料,將其制成骨粉,然后進(jìn)行酶解并對(duì)其酶解產(chǎn)物進(jìn)行抗氧化分析,同時(shí)對(duì)酶解液中氨基酸含量進(jìn)行分析。
　　 分別采用高溫高壓蒸煮和化學(xué)試劑脫脂脫鈣等方法進(jìn)行處理制成骨粉,經(jīng)試驗(yàn)證明最佳工藝為:高溫高壓(121℃,1kpa)蒸煮2小時(shí),趁熱脫去脂肪,經(jīng)水洗、烘干、粉碎制得骨粉,蛋白質(zhì)含量為24.9％。
　　 單酶水解實(shí)驗(yàn)。采用中性、堿性、風(fēng)味、復(fù)合蛋白酶以及木瓜蛋白酶五種酶分別對(duì)豬骨蛋白進(jìn)行酶解,以溫度、pH值、加

2、酶量、料液比以及酶解時(shí)間為單因素,確定各單酶水解的最佳酶解條件,其中堿性蛋白酶水解度最高,最大水解度為23.02％。
　　 響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。在單酶水解的基礎(chǔ)上選取堿性蛋白酶為最佳用酶,以單因素實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ),選取溫度、加酶量、底物濃度以及酶解時(shí)間作為4個(gè)因素進(jìn)行響應(yīng)面的優(yōu)化實(shí)驗(yàn),利用Desin Expert軟件獲得了水解度最高時(shí)的各個(gè)因素的最佳水解條件為:水解溫度51℃、料液比7％、加酶量為5000u/g,酶解時(shí)間為5h,理論水解度

3、為23.72％。且該模型具有較好的重復(fù)性。
　　 雙酶分步水解實(shí)驗(yàn)。在單酶酶解的基礎(chǔ)上,采用中性、堿性、木瓜、復(fù)合蛋白酶分別與風(fēng)味蛋白酶組合進(jìn)行雙酶分步水解,評(píng)價(jià)其水解效果,確定雙酶分步水解可大大提高水解度。其中用內(nèi)切的堿性蛋白酶和外切的風(fēng)味蛋白酶組合作用效果最好,先用堿性蛋白酶加酶量為5000u/g,在其最適條件下水解4h,之后再以5000u/g的加酶量加入風(fēng)味酶進(jìn)行水解,并且使水解條件保持在風(fēng)味酶的最適酶解條件,其水解度達(dá)到

4、36.9％,且反應(yīng)過(guò)程中不需要調(diào)整pH值。
　　 豬骨蛋白酶解液的抗氧化實(shí)驗(yàn)。本文對(duì)豬骨蛋白酶解液的抗氧化性進(jìn)行了研究,結(jié)果表明豬骨蛋白酶解液具有很好的抗氧化性。豬骨蛋白酶解液的還原力和對(duì)O2-的清除效果不是很明顯,效果均不如Vc和BHT。但豬骨蛋白水解液對(duì)OH·自由基及DPPH自由基具有很好的清除效果,酶解液濃度與OH·清除率之間呈正相關(guān),最高清除率達(dá)到94.53％,且當(dāng)濃度為160-40mg/ml時(shí),酶解液對(duì)OH·的清除率均