普洱茶與其它茶葉保健功效的比較及與儲(chǔ)存時(shí)間的相關(guān)性研究.pdf

1、【目的】:
　　 將普洱茶與滇紅茶（紅茶）、龍井（綠茶）、鐵觀音進(jìn)行比較，以茶氨酸、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)及咖啡因作為茶葉中抗疲勞成分及功能成分指標(biāo)，以小鼠抗疲勞經(jīng)典實(shí)驗(yàn)為動(dòng)物試驗(yàn)指標(biāo)對(duì)普洱茶的抗疲勞效果進(jìn)行了深入的研究，并比較了隨儲(chǔ)存年代，普洱茶抗疲勞效果的變化，為普洱茶的保健價(jià)值的評(píng)定提供了依據(jù)。
　　 建立了茶葉中未衍生化高效液相色譜法測(cè)定茶氨酸含量及非梯度洗脫的HPLC分析方法測(cè)定EGCG及咖啡因含

2、量的方法，為茶葉中抗疲勞有效成分的研究提供了可行的分析方法。
　　 【方法】:
　　 1．茶葉中茶氨酸、EGCG及咖啡因的測(cè)定方法
　　 1.1茶氨酸、EGCG和咖啡因的提取方法茶葉樣品粉碎過80目篩，茶葉中的茶氨酸以水提取，超聲30min，溫度設(shè)定70℃，提取2次。EGCG及咖啡因以50％的乙醇超聲提取30min，溫度設(shè)定70℃，提取2次。
　　 1.2色譜條件采用Inertsil ODS-C18柱(5

3、μm，4.6×250mm)，HPLC-DAD方法進(jìn)行測(cè)定，流速為1.0ml/min。測(cè)定茶氨酸為50％乙腈-0.1％磷酸（pH為2.5）(5:95，v/v)，測(cè)定EGCG及咖啡因?yàn)榧状?1.5×10-4mol/L KH2PO4溶液(磷酸調(diào)pH為3)(25:75，v/v)；
　　 2.2008年產(chǎn)滇紅茶、龍井（綠茶）、鐵觀音及普洱茶抗疲勞功效的比較研究
　　 健康雄性小鼠200只，18～22g，分成四批進(jìn)行試驗(yàn)，每批隨機(jī)分

4、為5組，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組，劑量根據(jù)預(yù)試驗(yàn)確定為1.34g/kg·bw。每組10只，分別灌胃給予滇紅茶、龍并、鐵觀音、2008年普洱茶樣品處理液，對(duì)照組給予蒸餾水；30d后實(shí)驗(yàn)一批進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)二批進(jìn)行血清尿素氮測(cè)定，實(shí)驗(yàn)三批進(jìn)行肝糖元和肝組織中銅、鋅、鐵(Cu、Zn、Fe)元素的測(cè)定，實(shí)驗(yàn)四批進(jìn)行血乳酸值測(cè)定。
　　 3.1996年、2000年、2004年、2008年四個(gè)不同貯藏年份普洱茶抗疲勞功效的比較研究

5、>　　 健康雄性小鼠100只，18-22g，分成兩批進(jìn)行試驗(yàn)，每批隨機(jī)分為5組，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組，劑量為1.34g/kg·bw。每組10只，分別灌胃給予1996年、2000年、2004年、2008年普洱茶樣品處理液，對(duì)照組給予蒸餾水；30d后實(shí)驗(yàn)一批進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)二批進(jìn)行血清尿素氮測(cè)定。
　　 【結(jié)果】:
　　 1．茶葉中茶氨酸、EGCG及咖啡因含量的測(cè)定結(jié)果
　　 三種成分在10～300μg/m

6、l濃度范圍內(nèi)，各組分峰面積與相應(yīng)濃度均呈良好線性關(guān)系，r＞0.999。各組分的加標(biāo)回收率在87％～102％之間，方法精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.42％～5.87％之間。滇紅茶、龍井、鐵觀音的茶氨酸含量分別為：5.11±0.21、14.43±0.65、5.93±0.32mg/g；1996年、2000年、2004年、2008年普洱茶的茶氨酸含量分別為：3.86±0.15、2.55±0.17、6.10±0.11、9.76±0.21mg/g；滇紅茶

7、、龍井、鐵觀音的EGCG含量分別為：13.41±2.35、64.60±3.38、49.85±7.76mg/g；1996年、2000年、2004年、2008年普洱茶的EGCG含量分別為：36.88±5.66、28.82±4.07、41.80±5.40、51.79±6.30mg/g；滇紅茶、龍井、鐵觀音的咖啡因含量分別為：27.72±0.67、24.19±2.21、18.28±0.36mg/g；1996年、2000年、2004年、2008年

8、普洱茶的咖啡因含量分別為：27.75±1.10、29.48±2.74、24.58±0.61、27.11±0.92mg/g。
　　 2.2008年產(chǎn)滇紅茶、龍井、鐵觀音及普洱茶抗疲勞功效的比較結(jié)果
　　 四個(gè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，其中紅茶組以滇紅茶為代表，綠茶組以龍井為代表；經(jīng)比較，紅茶組小鼠的游泳時(shí)間與對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的負(fù)重游泳時(shí)間均高于對(duì)照組(P＜0.05)，時(shí)間的長(zhǎng)短順序?yàn)椋壕G茶組

9、＞鐵觀音組＞2008普洱組＞紅茶組；四個(gè)實(shí)驗(yàn)組的血清尿素氮含量均低于對(duì)照組（P＜0.05），其中綠茶組的血清尿素氮水平最低，其余三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的血清尿素氮水平間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；紅茶組小鼠的肝糖元含量與對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的肝糖元含量均高于對(duì)照組，高低順序?yàn)椋?008普洱組＞綠茶組＞鐵觀音組＞紅茶組；四個(gè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組所取肝臟組織的Cu，F(xiàn)e，Zn的含量差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，四

10、個(gè)實(shí)驗(yàn)組所取肝臟組織Cu，F(xiàn)e，Zn的含量間差別也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；綠茶組與對(duì)照組的血乳酸曲線下面積差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其血乳酸曲線下面積低于對(duì)照組，其余三個(gè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 3.1996年、2000年、2004年、2008年四個(gè)不同貯藏年份普洱茶抗疲勞功效的比較結(jié)果
　　 與對(duì)照組比較，四個(gè)年份的普洱茶組均能延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間(P＜0.05)，不同年份茶葉

11、之間的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；與對(duì)照組比較，四個(gè)實(shí)驗(yàn)組均能降低小鼠運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮水平(P＜0.05)。其中1996年組的血清尿素氮水平高于2004年組和2008年組(P＜0.05)；2000年組的血清尿素氮水平高于2008年組（P＜0.05）。
　　 【結(jié)論】:
　　 1．本文所測(cè)四種茶葉中，總體上龍井（綠茶）的茶氨酸、EGCG、咖啡因含量最多，2008普洱茶成分含量低于龍井（綠茶），鐵觀音居中，滇紅茶（紅茶

12、）最低；根據(jù)2003年頒布的《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》，通過負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)、血清尿素氮實(shí)驗(yàn)、肝糖元測(cè)定、血乳酸測(cè)定四項(xiàng)抗疲勞指標(biāo)，在所確定的同一實(shí)驗(yàn)劑量(1.34g/kg·bw)下，2008年產(chǎn)龍井（綠茶）、鐵觀音、普洱茶都有抗疲勞功效，其中龍井的抗疲勞功效最佳，滇紅茶的抗疲勞功效尚不確定。初步分析，四種茶葉抗疲勞功效的差異與其中所含的茶氨酸、EGCG、咖啡因三種抗疲勞成分的含量差異有一定的關(guān)系。
　　 2．通過測(cè)定負(fù)重游泳實(shí)

13、驗(yàn)和血清尿素氮實(shí)驗(yàn)兩個(gè)主要抗疲勞指標(biāo)，在所確定的同一實(shí)驗(yàn)劑量下(1.34g/kg·bw)，2008年和2004年普洱茶的抗疲勞效果優(yōu)于1996年和2000年普洱茶，說明普洱茶的抗疲勞效果隨儲(chǔ)存年代呈下降趨勢(shì)，并非如市場(chǎng)炒作時(shí)所宣傳的普洱茶越陳，功效越強(qiáng)。
　　 3．通過對(duì)各實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組小鼠肝臟組織中必需微量元素Cu、Zn、Fe含量的測(cè)定，其結(jié)果表明：在實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)四種茶葉對(duì)小鼠肝臟組織中Cu、Zn、Fe的儲(chǔ)存含量均無明顯影響。<