NE在重度腦損傷合并胃液誤吸大鼠肺內(nèi)及血中的表達(dá)研究.pdf

1、目的:探討中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NeutrophilElastase,NE)在大鼠重度腦損傷誤吸致急性肺損傷早期的表達(dá)與變化,為重度腦損傷誤吸患者急性肺損傷發(fā)病機(jī)制的研究和臨床防治提供理論依據(jù)。
　　 方法:①采用改進(jìn)型Marmarou法建立大鼠重度腦損傷模型。②80只腦損傷模型大鼠隨機(jī)分為重度腦損傷組(SB組,n=40)和重度腦損傷誤吸組(SA組,n=40)。SA組大鼠在腦損傷后經(jīng)氣管滴入胃液(0.4ml/kg,pH=1.2)

2、制成腦損傷誤吸模型。SB組(又分為SB1、SB2、SB4、SB6組,每組10只)與SA組(又分為SA1、SA2、SA4、SA6組,每組10只)分別于造模成功后1h、2h、4h、6h處死大鼠,進(jìn)行有關(guān)指標(biāo)觀察和檢測。對照組(C組,n=10)不給予任何損傷處理。③應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測支氣管肺泡灌洗液(BALF)和血漿NE的含量;Real-timeRT-PCR法測定肺組織NEmRNA的表達(dá);免疫透射比濁法測定BALF中自蛋白濃

3、度;稱取肺組織的濕重、干重計(jì)算濕重/干重比;光鏡、電鏡觀察肺組織形態(tài)學(xué)改變。④用SPSS13.0軟件分析所得數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果:①雄性SD大鼠170只(含對照組10只),制作腦損傷模型過程中死亡73只,成功制作腦損傷模型87只,死亡率為45.63％;制作誤吸模型過程中,SA組共死亡8只,SA1、SA2、SA4、SA6組分別存活8、8、9、7只大鼠。②大鼠腦損傷后立即出現(xiàn)呼吸抑制,數(shù)秒至數(shù)分鐘后自行恢復(fù)呼吸,隨后出現(xiàn)呼吸急促,伴全

4、身抽搐、口唇及四肢發(fā)紺、偏癱、口鼻見泡沫樣血性分泌物等表現(xiàn)。大鼠昏迷期間,角膜反射及翻正反射等生理指標(biāo)消失。胃液滴入氣管后,大鼠出現(xiàn)嗆咳、煩躁、呼吸困難等癥狀。⑨肉眼觀察腦組織見出血及水腫;光鏡顯示蛛網(wǎng)膜下腔及腦實(shí)質(zhì)出血、腦血管擴(kuò)張充血、組織疏松、神經(jīng)細(xì)胞水腫等。④肉眼觀察C組大鼠肺組織無充血、水腫、出血及梗死灶,SB、SA組肺組織不同程度充血、水腫,表面可見點(diǎn)、片狀出血,擠壓時(shí)可見粉紅色泡沫狀液體溢出;光鏡觀察SB、SA組肺組織均可見

5、肺泡壁毛細(xì)血管擴(kuò)張充血,肺泡腔內(nèi)不同程度水腫液積聚伴出血,肺間質(zhì)水腫、肺泡間隔增寬伴中性粒細(xì)胞浸潤;電鏡顯示SB、SA組肺泡Ⅰ型上皮細(xì)胞及線粒體腫脹,胞核染色質(zhì)邊集、固縮甚至消失;肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞胞核變形,線粒體及板層小體呈空泡樣變,絨毛變形、脫落。⑤SB、SA組BALF、血漿及肺組織NE水平均較C組明顯升高(P＜0.01),NE濃度隨時(shí)間發(fā)展逐步增高;SA組不同時(shí)相點(diǎn)NE水平較SB組相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)明顯升高(P＜0.01)。⑥SB2～SB6

6、、SA1～SA6組BALF中白蛋白濃度與C組比較明顯升高(P＜0.01),且隨時(shí)間延長呈上升趨勢;SA組各時(shí)相點(diǎn)白蛋白濃度較SB組同時(shí)相點(diǎn)明顯增加(P＜0.01)。⑦SB6、SA4、SA6組肺W/D較C組明顯升高(P＜0.01),其余各組肺W/D與C組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);SA6組肺W/D明顯高于SB6組(P＜0.01),SA組其余各時(shí)相點(diǎn)肺W/D與SB組同時(shí)相點(diǎn)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:①NE