慢性腎功能不全氧化應(yīng)激現(xiàn)象及低分子肝素抗氧化作用的研究.pdf

1、氧化應(yīng)激(oxidative stress,OS)是指反應(yīng)性氧化物(reactive oxidativespecies,ROS)增多而抗氧化能力減弱,對(duì)機(jī)體造成的潛在傷害。研究證明氧化應(yīng)激是腎臟疾病及并發(fā)癥的重要致病因素。氧化應(yīng)激作為慢性腎臟病患者的危險(xiǎn)因素逐漸獲得重視及認(rèn)可。目前研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激在某些腎臟疾病中尤為嚴(yán)重,如系膜增生性腎臟疾病及糖尿病腎病。氧化應(yīng)激是否只與腎臟原發(fā)病相關(guān),還是隨著腎功能的減退逐漸增強(qiáng),與慢性腎臟疾病毒素的

2、蓄積有關(guān)?目前這方面的研究很少。氧化應(yīng)激雖然是慢性腎臟病及其并發(fā)癥亟待解決的問題,但是目前如何評(píng)價(jià)氧化應(yīng)激程度方面還沒有定論,氧化還原指標(biāo)的建立和測(cè)量方法也還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。近年,臨床已開始通過多種途徑干擾反應(yīng)性氧化物(reactiveoxidative species,ROS)的產(chǎn)生,然而現(xiàn)今在臨床上被證實(shí)有應(yīng)用價(jià)值的抗氧化劑很少。低分子肝素是腎臟病的常用藥物,除抗凝作用外,最近不少研究報(bào)道低分子肝素還具有抗氧化、抗炎、抗腎小球系膜細(xì)

3、胞增生及降低蛋白尿和膽固醇等作用。對(duì)于低分子肝素的抗氧化作用,國外有研究通過體內(nèi)或體外證實(shí)。
　　 第一部分:慢性腎功能不全氧化應(yīng)激現(xiàn)象的研究
　　 目的:研究慢性腎臟病患者體內(nèi)的氧化應(yīng)激狀態(tài),觀察氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)是否隨著腎功能的減退逐漸增強(qiáng),并確定可以穩(wěn)定反應(yīng)體內(nèi)氧化應(yīng)激的指標(biāo)。
　　 方法:以2008年7月到12月我院CKD1-5期住院患者為研究對(duì)象,測(cè)定血常規(guī)、血脂、高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、白蛋白

4、及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、微量丙二醛(MDA)、過氧化氫酶(CAT)及晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)等氧化指標(biāo)。選取我院骨科無腎臟疾病的患者作為正常對(duì)照組,測(cè)定血常規(guī)、GSH-PX、SOD、btDA、CAT及AOPP水平。
　　 結(jié)果:共收集CKD1-5期患者73例血液標(biāo)本,其中CKD1-5期患者分別為10、10、22、18、13例。骨科無腎臟疾病的患者10例作為正常對(duì)照組。血漿晚期氧化蛋白產(chǎn)

5、物(AOPP)水平在對(duì)照組顯著低于CKD1-5期(P＜0.05);在CKD1-5各組之間亦有顯著性差異:CKD2期患者血漿AOPP水平顯著高于CKD1期(108.37±35.78 vs97.45±41.36μ mol/ml,P＜0.05),CKD3期患者血漿AOPP水平顯著高于CKD2期(118.98±33.35 vs108.37±35.78μ mol/ml,P＜0.05),CKD4期患者血漿AOPP水平顯著高于CKD3期(128.68

6、±38.51 vs118.98±33.35μmol./ml,P＜0.05),CKD5期顯著高于CKD4期(135.74±33.87 vs128.68±38.51μmol/ml,P＜0.05)。
　　 (1)血漿谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活力在對(duì)照組顯著高于CKD1-5期(P＜0.05)。在CKD3期顯著高于CKD4期(128.78±34.58 vs120.17±39.41×104U/L,P＜0.05);CKD1-3期各組

7、間及CKD4期與CKD5期之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 (2)血漿微量丙二醛(MDA)水平在對(duì)照組顯著低于CKD1-5期(P＜0.05),在CKD3期顯著高于CKD2期(4.76±1.45 vs2.96±1.55nmol/ml,P＜0.05),CKD4期顯著高于CKD3期(5.03±1.14 vs4.76±1.45nmol/ml,P＜0.05);CKD1與CKD2期之間及CKD4期與CKD5期之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0

8、.05)。
　　 (3)血漿過氧化物歧化酶(SOD)活力在對(duì)照組顯著高于CKD1-5期(p＜0.05),在CKD3期顯著高于CKD4期(P＜0.05);在CKD1-3期之間及CKD4期與CKD5期間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 (4)血漿過氧化氫酶(CAT)活力在對(duì)照組顯著高于CKD1-5期(P＜0.05);在CKD4期顯著高于CKD3期(P＜0.05);而在CKD4期顯著高于CKD5期(P＜0.05),在CKD

9、1-3期之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 (5)血紅蛋白在CKD3期顯著高于CKD4期(P＜0.05),在CKD4期顯著高于CKD5期(P＜0.05),在CKD1-3期各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;膽固醇、LP(a)在CKD4期顯著高于CKD3期(P＜0.05),在CKD5期顯著高于CKD4期(P＜0.05),在CKD1-3期各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 (6)血漿AOPP水平與血總膽固醇存在相關(guān)性(r=0.897,P=0.

10、039);血漿SOD活力與血總膽固醇、LP(a)及血紅蛋白之間存在相關(guān)性(r=-0.985,P=0.002;r=-0.90,P=0.037;r=0.954,P=0.012);血漿GSH-PX活力與血總膽固醇、UP(a)及血紅蛋白之間存在相關(guān)性(r=-0.954,P=0.012;r=-0.90,P=0.02;r=0.911,P=0.031);血漿MDA水平與血總膽固醇及LP(a)之間存在相關(guān)性(r=0.763,P=0.034;r=0.71

11、8,P=0.042),與血紅蛋白之間不存在相關(guān)性。
　　 (7)hs-CRP與血漿AOPP、SOD、GSH-PX及MDA水平密切相關(guān)(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)CKD患者體內(nèi)氧化應(yīng)激水平與對(duì)照組相比明顯升高,氧化應(yīng)激現(xiàn)象在腎臟疾病中尤為嚴(yán)重。
　　 (2)在CKD1-5期,氧化應(yīng)激現(xiàn)象隨著腎功能的減退逐漸加重。
　　 (3)血漿AOPP水平在CKD1-5期各組間均有顯著性差異,隨

12、著腎功能的減退逐漸升高;血漿MDA、GSH-PX及SOD總體上是隨著腎功能減退逐漸升高的,但在某些組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血漿AOPP水平是反映機(jī)體氧化應(yīng)激水平的的穩(wěn)定指標(biāo),血漿GSH-PX、SOD活力及MDA水平次之,血漿CAT活力的穩(wěn)定性比較差。
　　 (4)CKD患者隨著腎功能的減退,貧血及脂代謝紊亂進(jìn)一步加重。氧化應(yīng)激的強(qiáng)度隨著血紅蛋白濃度的降低及脂代謝紊亂的加重而增加。
　　 (5)CKD患者體內(nèi)氧化應(yīng)激與微炎癥

13、狀態(tài)密切相關(guān)。
　　 第二部分低分子肝素抗氧化作用的研究
　　 目的:闡明在慢性腎臟病時(shí)低分子肝素是否具有抗氧化作用,為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:選取CKD3-5期住院患者,將符合入組條件的患者隨機(jī)分為兩組:低分子肝素治療(速碧林0.4ml/天×10天)組及谷胱甘肽治療組(生理鹽水250ml+泰特1.8g/天×10天)。比較治療前后腎功能及氧化指標(biāo)(MDA、SOD、GSH-PX、AOPP、CAT)的變化

14、。
　　 結(jié)果:最終共入選40例,隨機(jī)分組,其中共有3例因故中斷或退出,低分子肝素組2例,谷胱甘肽組1例。實(shí)際完成37例,低分子肝素組18例,谷胱甘肽組19例,年齡17～81(50.8±12.3)歲。
　　 (1)晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP):低分子肝素治療后AOPP水平顯著降低(130.82±21.95 vs127.96±25.11μmol/l,P＜0.05);谷胱甘肽治療后AOPP水平顯著降低(117.23±19.5

15、3 vs112.34±20.07μ mol/l,P＜0.05);谷胱甘肽治療組AOPP降低值顯著高于低分子肝素組(P＜0.05)。
　　 (2)谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX):低分子肝素治療后GSH-PX活力顯著升高(115.51±41.35 vs126.31±36.42×104U/L,P＜0.05);谷胱甘肽治療后GSH-PX活力顯著升高(122.76±33.34 vs120.28±46.08×104U/L,P＜0.05)

16、;但低分子肝素組與谷胱甘肽治療組間GSH-PX升高值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 (3)丙二醛(MDA):低分子肝素治療前后MDA水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(5.54±1.66vs5.42±1.40nmol/ml,P＞0.05);谷胱甘肽治療后MDA活力顯著降低(5.09±1.44 vs4.61±1.30 nmol/ml,P＜0.05)。
　　 (4)過氧化氫酶(CAT):低分子肝素治療前后、谷胱甘肽治療前后CAT活力均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,(P