新型化學(xué)修飾電極的制備及應(yīng)用.pdf

1、化學(xué)修飾電極在分子層面上實(shí)現(xiàn)了對(duì)電極功能的設(shè)計(jì),可以按意圖賦予電極預(yù)定的功能,以便能選擇性地進(jìn)行檢測(cè)反應(yīng)。本文主要研究了三種化學(xué)修飾玻碳電極的制備及其在生物傳感與化學(xué)傳感中的應(yīng)用,主要包括以下內(nèi)容：
　　 ⑴通過共價(jià)鍵合法將轉(zhuǎn)錄因子Sp1修飾在玻碳電極表面,并以之作為探針使用交流阻抗法(EIS)與差示脈沖法(DPV)檢測(cè)其與樣品DNA的特異性結(jié)合。結(jié)果顯示,我們的方法可有效地將活性Sp1修飾到電極表面,且該修飾電極不僅可用于研究

2、Sp1與其DNA識(shí)別序列在不同條件下的結(jié)合和解離,還可用于研究點(diǎn)突變與抑制劑(抗癌藥品光輝霉素)對(duì)結(jié)合的影響。此外,對(duì)該修飾電極的特異性、靈敏度、重復(fù)性以及再生能力都進(jìn)行了研究,結(jié)果表明其能夠在大量無關(guān)DNA序列中檢測(cè)出低至1×10-10mol/L的特異性結(jié)合序列(wtDNA)。
　　 ⑵在上述修飾電極的基礎(chǔ)上,為進(jìn)一步提高電極性能,以葡萄糖為原料通過水熱法制備了有良好生物相容性和導(dǎo)電性的碳納米球(CNP),使用CNP修飾玻碳電

3、極后再與Sp1通過酰胺鍵偶聯(lián)。結(jié)果顯示,CNP的修飾進(jìn)一步優(yōu)化了該蛋白修飾電極的檢測(cè)性能,具體表現(xiàn)在:檢測(cè)信號(hào)的背景干擾降低、信噪比明顯增大,對(duì)wtDNA檢測(cè)限降低了5個(gè)數(shù)量級(jí)達(dá)到1 fM,且電極的再生能力得到了極大的增強(qiáng),有望成為一種快速而有效的檢測(cè)手段,以用于DNA結(jié)合蛋白與其識(shí)別序列間相互作用的研究,及對(duì)其新DNA識(shí)別位點(diǎn)的篩查和新型藥物抑制劑的篩選。
　　 ⑶使用Nafion膜將半胱氨酸修飾的碳納米球固定在玻碳電極表面,