夏秋綠茶中茶氨酸的提取分離純化及對(duì)腸道微生態(tài)的影響.pdf

1、茶氨酸是茶葉中特有的氨基酸，具有抗腫瘤，增強(qiáng)記憶力等多種活性，在功能食品方面有很大的應(yīng)用前景。中國(guó)夏秋綠茶產(chǎn)量高，但年年積壓嚴(yán)重，資源利用率低。從夏秋綠茶中直接提取，分離茶氨酸，能更好的保證其天然性質(zhì)，是最直接，安全和有效的生產(chǎn)途徑。本研究擬在前人研究的基礎(chǔ)上，采用提取優(yōu)化，超濾，靜態(tài)吸附，動(dòng)態(tài)層析結(jié)合的方法，建立一套純度高，成本低，工業(yè)可行的茶氨酸提取分離和純化的工藝，并研究該工藝制備得到的茶氨酸對(duì)腸道微生態(tài)的影響。主要研究結(jié)果如下:

2、
　　1.利用正交試驗(yàn)優(yōu)化得出荼氨酸提取的最佳條件為:提取料液比1∶20，提取溫度95℃，提取時(shí)間45min。
　　2.直接水提的茶湯中含有大分子蛋白質(zhì)，高分子多糖及絮狀沉淀，需經(jīng)過(guò)超濾處理。通過(guò)比較選擇10K孔徑的膜，操作壓力為0.3MPa，溶液溫度35℃時(shí)具有最佳的效果。經(jīng)過(guò)超濾處理后的荼湯澄澈明凈，大分子蛋白質(zhì)和絮狀沉淀基本去除，茶多糖除掉40％以上，茶多酚去除率達(dá)到30％，而咖啡堿和荼氨酸的量處理前后改變不大。

3、>　　3.吸附能進(jìn)一步除去茶湯中的茶多酚等物質(zhì)，本研究表明PA樹(shù)脂對(duì)茶多酚的選擇吸附量達(dá)到了76.36mg/g，且回收率高，對(duì)茶氨酸吸附量很少，利用PA樹(shù)脂靜態(tài)吸附可以很好的分離和富集茶多酚。
　　4.分離荼氨酸和咖啡堿用的是NKA-Ⅱ樹(shù)脂動(dòng)態(tài)層析，上樣后用蒸餾水以1BV/h的流速洗脫得到純度99.12％的茶氨酸，一次得率59.26％，1.5-2.5BV之間的洗脫液濃縮后再次上樣，茶氨酸的得率可提高至75.12％,之后用80％乙醇

4、洗脫層析柱可得到純度99％的咖啡堿副產(chǎn)品。NKA-Ⅱ樹(shù)脂使用五次后分離效果沒(méi)有明顯的改變，具有很好的工業(yè)應(yīng)用前景。
　　5.采用體外厭氧糞樣混合培養(yǎng)的方式對(duì)茶氨酸產(chǎn)品進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，通過(guò)FISH技術(shù)對(duì)24小時(shí)內(nèi)有益茵群、有害菌群以及總菌群的數(shù)量變化進(jìn)行測(cè)定，運(yùn)用HPLC測(cè)定24h內(nèi)腸道短鏈脂肪酸的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)茶氨酸在一定程度上能促進(jìn)乳酸菌和真細(xì)菌梭菌屬的生長(zhǎng)，對(duì)其它三種細(xì)菌有一定的抑制作用，細(xì)菌總數(shù)比空白對(duì)照組略低。腸道短鏈脂肪酸