電化學(xué)免疫傳感器在血吸蟲病診斷中的研究和應(yīng)用.pdf

1、血吸蟲病是一種分布廣，種類多，危害性較為嚴(yán)重的病原體寄生蟲病，目前檢測血吸蟲病的方法主要是傳統(tǒng)的免疫分析法，但都需要較為復(fù)雜、昂貴的儀器及技術(shù)熟練的分析人員。同時(shí)因?yàn)殪`敏度低，僅能用于簡單的定性或半定量分析，不能完全適應(yīng)目前血吸蟲病防治工作的需要。為了血吸蟲病的早期診斷、預(yù)防、治療，開發(fā)研制一種靈敏、簡便、快捷的檢測方法具有較大意義。電化學(xué)免疫傳感器本身所具有的靈敏、快速、低成本、低能耗等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于各種分子診斷中，主要包括核酸(

2、包括DNA和RNA)的分子診斷、蛋白質(zhì)的分子診斷和代謝物的分子診斷，并逐漸成為非常有潛力的檢測技術(shù)之一。本論文探討了電化學(xué)生物傳感器在血吸蟲病診斷中的研究和應(yīng)用。
　　 首先建立了一種新的電化學(xué)免疫傳感方法，并將其應(yīng)用于實(shí)際樣本的檢測。用辣根過氧化物酶(HRP)及新型底物鄰.氨基苯酚(O-Aminophenol，O-AP)構(gòu)建了基于“酶-鄰氨基苯酚”體系的電化學(xué)免疫傳感方法，并用于血吸蟲抗體檢測。鄰-氨基苯酚在辣根過氧化物酶(H

3、RP)催化雙氧水(H2O2)時(shí)被氧化，生成的產(chǎn)物3-氨基吩噁嗪能通過電化學(xué)方法檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了基于“酶-鄰氨基苯酚”的新型蛋白檢測體系檢測人血清中血吸蟲抗體的可操作性，實(shí)現(xiàn)了實(shí)際樣本的檢測。并且，采用方波伏安法作為最終檢測方法，具有更高的靈敏性。
　　 隨后設(shè)計(jì)了一種基于血吸蟲抗體檢測的多通量電化學(xué)免疫傳感器。類似酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)，將捕獲探針抗原組裝在電極上，待檢物靶標(biāo)蛋白和酶標(biāo)二抗分別反應(yīng)后，通過檢測辣根過氧化物酶催化底物