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1、電化學(xué)阻抗免疫傳感器是通過檢測(cè)修飾電極的界面特性來檢測(cè)樣品中抗體/抗原目標(biāo)物的一種有效方法。電化學(xué)阻抗免疫傳感技術(shù)結(jié)合了電化學(xué)阻抗的高靈敏性和免疫反應(yīng)的高特異性,可響應(yīng)修飾有生物分子的電極界面的電子轉(zhuǎn)移速率的信號(hào)變化,以簡(jiǎn)便、快速、靈敏、響應(yīng)范圍廣、不用示蹤標(biāo)記物、不需樣品純化、可進(jìn)行自動(dòng)化實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)輸出等優(yōu)點(diǎn),突破了以往分析方法的諸多瓶頸,在生化檢驗(yàn)方面顯示出誘人的應(yīng)用前景。本論文一方面利用親和素生物素放大建立了一種高靈敏的電化學(xué)免疫阻
2、抗傳感技術(shù);另一方面結(jié)合納米生物修飾技術(shù),設(shè)計(jì)一系列免疫活性材料固定化新方法,探索臨床重大疾患干燥綜合癥B (anti-Sjogren’s syndrome B)的傳感診斷新技術(shù)。具體內(nèi)容包括:
(1)將巰基苯胺(p-aminobenzenthiol,p-ABT)組裝于金電極表面,進(jìn)而電聚合形成穩(wěn)定、致密、有序的 p-ABT 納米復(fù)合膜界面,固定功能化的碳納米管后,再通過引入親和素-生物素放大系統(tǒng),將生物素化羊抗人IgG固
3、定于電極表面,用以檢測(cè)hIgG,建立了一種高靈敏的電化學(xué)免疫阻抗傳感器,獲得傳感器的線性范圍為 0.01~100 ng/Ml,檢測(cè)下限為0.0075 ng/Ml。
(2)首次在玻碳電極上自組裝羥基磷灰石/碳納米管復(fù)合物,制備了檢測(cè)干燥綜合癥B (anti-Sj?gren’s syndrome B)抗體的阻抗傳感器。結(jié)果表明,具有生物相容性的羥基磷灰石和電子轉(zhuǎn)移載體的碳納米管的羥基磷灰石/碳納米管的復(fù)合物便于免疫電化學(xué)特別是
4、阻抗的檢測(cè)。利用本文制作的傳感器對(duì)抗干燥綜合癥B抗體檢測(cè)的線性范圍是稀釋比1:800~1:50,檢測(cè)下限為1:853,為了檢驗(yàn)傳感器的實(shí)用性,進(jìn)行了回收率實(shí)驗(yàn),結(jié)果令人滿意。該免疫傳感方法有望成為的臨床自身免疫疾病中的檢測(cè)自身抗體新的替代方法。
(3)采用電聚合羥基磷灰石(Hydroxyapatite)和膠原蛋白表面形成納米復(fù)合物層用于介導(dǎo)抗體在玻碳電極表面的固定化。以羊抗人IgG抗體-抗原體系為測(cè)試模型,采用該方法固定了
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