點(diǎn)擊化學(xué)18氟標(biāo)記腫瘤靶向肽T7正電子分子探針合成及其初步評(píng)價(jià).pdf

1、目的:
　　T7肽（序列為HAIYPRH）是運(yùn)用噬菌體展示技術(shù)篩選而來具有特異性靶向轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的多肽，對(duì)膠質(zhì)瘤、肝細(xì)胞肝癌等高表達(dá)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的腫瘤具有特異性靶向作用，目前僅見其用于細(xì)胞親和性實(shí)驗(yàn)及靶向載藥研究，尚未見到有關(guān)對(duì)其進(jìn)行放射性標(biāo)記的研究。本文根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，在T7肽的氨基端修飾疊氮基，選用三甘醇作為18F標(biāo)記中間體的起始反應(yīng)物，運(yùn)用點(diǎn)擊化學(xué)的方法，在“一鍋兩步”的反應(yīng)中合成18F標(biāo)記的T7多肽，制備新型的腫瘤顯像

2、探針，并進(jìn)行初步的生物學(xué)評(píng)價(jià)，為將來進(jìn)一步開發(fā)新的腫瘤特異性正電子放射性核素標(biāo)記的分子探針奠定基礎(chǔ)。
　　方法:
　　多肽探針的合成制備主要分為非放射性合成和放射性實(shí)驗(yàn)兩大部分。在非放射性合成中，以三甘醇為原料，使用常規(guī)的有機(jī)化學(xué)方式逐步合成含炔甲苯磺酸鹽(TsOTEGay)，并經(jīng)過核磁氫譜鑒定結(jié)構(gòu)。在放射性實(shí)驗(yàn)中，加速器產(chǎn)生的18F陰離子在K222/K2CO3乙腈溶液與標(biāo)記前體TsOTEGay發(fā)生親核取代反應(yīng)合成標(biāo)記中間體

3、18F-TEGay。不經(jīng)過純化處理，把修飾有疊氮基的T7肽和點(diǎn)擊反應(yīng)催化體系（CuSO4·5H2O、ASC及THPTA）混合后，通過點(diǎn)擊反應(yīng)生成靶向腫瘤正電子探針18F-TEG-T7。同時(shí)合成標(biāo)準(zhǔn)品19F-TEG-T7并進(jìn)行質(zhì)譜分析。對(duì)放射性探針18F-TEG-T7經(jīng)過Radio-HPLC進(jìn)行表征并與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比確認(rèn)，進(jìn)一步分離純化。通過酯水分配系數(shù)實(shí)驗(yàn)，了解探針的物理性質(zhì)。將探針經(jīng)鼠尾靜脈注射入小鼠體內(nèi)，以觀察其體內(nèi)的分布情況。

4、　　結(jié)果:
　　標(biāo)準(zhǔn)品19F-TEG-T7的質(zhì)譜分析分子量與理論值相符合。18F-TEG-T7采用兩步法成果合成，整個(gè)標(biāo)記流程用時(shí)約120 min。Radio-HPLC結(jié)果示第一步親核取代反應(yīng)得到標(biāo)記中間體18F-TEGay的放化產(chǎn)率約78％±7.43％，第二步點(diǎn)擊反應(yīng)得到18F-TEG-T7的放化產(chǎn)率約為28.26±7.43％（衰減校正后），兩步總放化產(chǎn)率為24.56％±15.59％(n=3)。18F-TEG-T7的脂水分配系數(shù)

5、為-0.51±0.01，正常小鼠體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)顯示18F-TEG-T7在正常小鼠體內(nèi)腎臟的攝取最高，為4.09±0.86％ID/g，多肽探針主要通過腎臟代謝。
　　結(jié)論:
　　通過“一鍋兩步”點(diǎn)擊化學(xué)，成功制備出18F-TEG-T7新型多肽類分子探針，精簡(jiǎn)了標(biāo)記流程，減少了標(biāo)記時(shí)間，并提高了探針的放化產(chǎn)率。18F-TEG-T7的正常小鼠體內(nèi)分布顯示分子探針主要通過腎臟代謝。本研究結(jié)果有望用于進(jìn)一步開發(fā)新的多肽類正電子分子探針。